25-羟维生素D3 [25(OH)D3]：维生素D在血液循环中的主要存在形式，是评估人体维生素D营养状况的金标准指标。
1,25-二羟维生素D3 [1,25(OH)2D3]：维生素D的活性激素形式，由25(OH)D3在肾脏等组织中经1α-羟化酶作用生成，负责主要的生物学功能。
24,25-二羟维生素D3 [24,25(OH)2D3]：维生素D的降解代谢产物，通过C24羟基化途径生成，反映维生素D的分解代谢水平。
维生素D3原（7-脱氢胆固醇）：皮肤中合成维生素D3的前体物质，经紫外线照射后转化为维生素D3。
维生素D3（胆钙化醇）：由皮肤合成或从膳食摄入的维生素D初始形式，在肝脏中转化为25(OH)D3。
维生素D2及其代谢物：检测来自植物源的维生素D2（麦角钙化醇）及其25-羟化产物，用于区分D2与D3来源。
维生素D结合蛋白（DBP）：血液中运输维生素D代谢物的主要载体蛋白，其浓度和基因多态性影响游离维生素D水平。
相关脂肪酸代谢物：分析与维生素D吸收和代谢相关的脂质分子，如胆汁酸、游离脂肪酸等。
钙、磷离子浓度：维生素D核心的生理功能是调节钙磷代谢，因此同步检测血清/尿液中钙磷水平至关重要。
甲状旁腺激素（PTH）：与维生素D代谢形成紧密反馈调节的关键激素，其水平变化是通路分析的重要参考。
血清/血浆样本：最常用的生物样本类型，用于检测循环中维生素D代谢物及其结合蛋白的浓度。
组织样本（肝、肾、肠）：获取维生素D代谢关键酶（如CYP2R1， CYP27B1）活性及局部代谢物浓度的直接材料。
细胞培养上清及裂解液：用于体外研究药物、基因扰动对维生素D代谢通路影响的模型样本。
尿液样本：用于检测维生素D代谢物的排泄形式，评估肾脏代谢与排泄功能。
维生素D代谢全通路分子：覆盖从前体、初级代谢物、活性形式到降解产物的完整代谢路径。
游离与结合形态维生素D：区分并检测具有生物活性的游离形式与蛋白结合的总形式。
低丰度活性代谢物：如1,25(OH)2D3，其浓度极低（pg/mL级别），对检测灵敏度要求极高。
结构类似物与同分异构体：精确区分25(OH)D2与25(OH)D3，以及可能的差向异构体。
通路关联激素与细胞因子：涵盖PTH、FGF23、降钙素等调节维生素D代谢的激素网络。
代谢组学广谱覆盖：在靶向分析维生素D通路的同时，进行非靶向筛查，发现新的关联代谢物。
液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）：当前维生素D代谢物检测的金标准方法，具有高特异性、高灵敏度和多组分同时分析能力。
同位素稀释技术：使用稳定同位素标记的内标（如d3-25(OH)D3），实现绝对定量，保证结果的准确性与精密度。
固相萃取（SPE）前处理：用于从复杂生物样本中高效富集、纯化维生素D代谢物，去除磷脂和蛋白质干扰。
衍生化技术：采用狄尔斯-阿尔德反应衍生化试剂（如PTAD）提高维生素D代谢物的离子化效率与检测灵敏度。
免疫亲和色谱：利用特异性抗体纯化样本中的维生素D代谢物或DBP，用于超低浓度样本分析。
酶联免疫吸附法（ELISA）：用于检测DBP、PTH等大分子蛋白，操作相对简便，适合高通量筛查。
化学发光免疫分析法（CLIA）：自动化程度高，常用于临床大批量样本中25(OH)D的快速检测。
气相色谱-质谱法（GC-MS）：经典方法，需复杂的衍生化步骤，目前多用于特定研究或作为参考方法。
超高效液相色谱（UHPLC）分离：提供更高的色谱分离度、速度和峰容量，有效分离结构相似的代谢物。
高分辨率质谱（HRMS）非靶向筛查：利用Q-TOF或Orbitrap等高分辨质谱进行未知代谢物发现和通路扰动分析。
三重四极杆质谱仪（Triple Quadrupole MS）：LC-MS/MS方法的核心设备，通过多反应监测模式实现维生素D代谢物的高灵敏度靶向定量。
高分辨率质谱仪（如Q-TOF， Orbitrap）：用于非靶向代谢组学分析，精确测定代谢物分子量，发现新的通路相关分子。
超高效液相色谱仪（UHPLC）：配备C18反相色谱柱，提供快速、高效的色谱分离，缩短分析时间并提高峰形。
自动化样品制备系统：集成液体处理、SPE等模块，实现从样本分配到上样前处理的全流程自动化，保证重现性。
氮吹浓缩仪：用于在样品前处理过程中，温和地将萃取液中的溶剂吹干，浓缩目标分析物。
高速冷冻离心机：用于快速分离血清/血浆、沉淀蛋白质，是样本预处理的关键设备。
化学发光免疫分析仪：专门用于运行CLIA试剂盒，自动化完成孵育、洗涤、检测和结果计算。
酶标仪：用于读取ELISA等基于比色或荧光检测的实验结果。
超低温冰箱（-80°C）：长期稳定保存生物样本和标准品，防止维生素D代谢物降解。
实验室信息管理系统（LIMS）：管理从样本接收、检测过程到数据报告的全流程，确保数据完整性和可追溯性。
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