
单克隆抗体纯度分析:评估单克隆抗体样品中目标抗体与杂蛋白(如宿主细胞蛋白、其他抗体片段)的分离程度和相对含量。
多克隆抗体异质性评估:分析多克隆抗血清中针对同一抗原的不同抗体亚群的分布和比例,反映其组成复杂性。
抗体片段鉴定(Fab/Fc):通过电泳分离并鉴定经酶切处理后产生的抗体片段,如抗原结合片段(Fab)和可结晶片段(Fc)。
抗体聚合体检测:识别和定量抗体样品中因聚集形成的高分子量聚合物,这与药物的安全性和有效性密切相关。
抗体降解产物分析:检测在储存或处理过程中产生的抗体降解片段,如轻链或重链的断裂产物。
糖基化模式初步筛查:基于电荷差异,初步分析抗体糖基化修饰的异质性,不同糖型在电泳图谱上可能呈现多条带。
等电点(pI)测定:通过等电聚焦电泳确定抗体的等电点,用于表征其电荷异质性和稳定性。
效价相对定量:在相同条件下电泳,通过比较目标条带的信号强度,对不同批次或处理组的抗体进行相对效价评估。
电荷变异体分析:分离并鉴定因脱酰胺、氧化、糖基化等翻译后修饰导致的抗体电荷变异体(如酸性、碱性峰)。
工艺相关杂质检测:监测下游纯化工艺中可能引入的杂质,如Protein A残留、培养基成分等(需结合特定染色方法)。
杂交瘤细胞培养上清:用于筛选和初步评估杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体的表达水平和基本特性。
腹水或血清样品:对从小鼠腹水或免疫动物血清中获取的多克隆或单克隆抗体进行粗提后的质量分析。
蛋白纯化中间品:在抗体纯化工艺流程的不同阶段取样,监控纯化效果和杂质去除情况。
药物原液与制剂:对生物制药最终的原液和成品制剂进行放行检验和质量一致性评价的核心项目之一。
稳定性研究样品:在加速稳定性或长期稳定性试验中,定期取样分析抗体效价和完整性的变化趋势。
对照品与参考品:用于建立分析方法时,对标准品或参考品的电荷异质性和纯度进行标定。
偶联标记抗体:评估抗体与荧光染料、酶、生物素等分子偶联前后的大小、纯度及电荷变化。
不同物种来源抗体:适用于人源化、嵌合、鼠源等多种物种来源的IgG、IgM、IgA等各类免疫球蛋白分析。
临床前研究样本:在药效学和药代动力学研究中,对给予动物体内的抗体药物进行回收和分析。
质量控制放行检验:作为生物制品出厂前的强制性检验项目,确保每批产品符合预定的纯度与一致性标准。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):在变性条件下根据分子量大小分离抗体亚基,用于评估纯度、降解和聚合。
非还原SDS-PAGE:在不加入还原剂的情况下进行电泳,用于观察完整抗体的分子量及聚合体状态。
还原SDS-PAGE:加入β-巯基乙醇或DTT等还原剂断开二硫键,将抗体解离为重链和轻链进行分析。
毛细管电泳-十二烷基硫酸钠(CE-SDS):自动化、定量化的毛细管区带电泳方法,是替代传统SDS-PAGE的高精度技术。
成像毛细管等电聚焦(icIEF):在高分辨率毛细管中进行等电聚焦,并结合全柱成像检测,精确定量抗体的电荷变异体。
琼脂糖凝胶电泳(AGE)
琼脂糖凝胶电泳(AGE):在非变性条件下基于抗体的净电荷和分子大小进行分离,常用于血清免疫球蛋白的粗略分型。
Western Blotting(免疫印迹)
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垂直板凝胶电泳系统强>
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