半数致死剂量（LD50）测定：通过不同剂量组动物死亡率，计算引起50%实验动物死亡的单一给药剂量，是评价急性毒性的核心指标。
临床观察：给药后密切观察动物的外观、行为、分泌物、排泄物等变化，记录中毒症状及其出现与消失时间。
体重变化监测：定期称量并记录实验动物体重，分析受试物对动物生长发育或代谢的急性影响。
摄食量与饮水量记录：监测给药后动物的食物和水的消耗情况，评估受试物对基本生理功能的影响。
大体解剖学检查：试验结束时对死亡及存活动物进行系统解剖，肉眼观察各组织器官有无异常变化。
死亡动物时间分布记录：详细记录各剂量组动物的死亡数量及死亡发生时间，用于分析毒性反应动力学。
中毒反应症状评分：根据预先制定的标准，对观察到的中毒症状（如活动减少、震颤、呼吸困难等）进行严重程度分级评分。
最大耐受量（MTD）探索：在未引起动物死亡的前提下，探索单次给药所能耐受的最大剂量。
剂量-反应关系分析：分析不同给药剂量与毒性反应发生率及严重程度之间的关联，确定毒性阈值。
病理组织学筛查（必要时）：对大体解剖中发现异常的器官组织进行取样、固定、切片和染色，做初步的显微镜下观察。
实验动物种属选择：通常选用健康成年SPF级大鼠和小鼠，必要时可选用其他啮齿类或非啮齿类动物。
受试物剂型范围：适用于王枣子的水提物、醇提物、或其他有机溶剂提取物制成的溶液、混悬液或冻干粉。
给药途径范围：涵盖经口灌胃、腹腔注射、皮下注射等拟临床或可能暴露的给药途径。
剂量设计范围：包括从预计无毒剂量到可能引起严重毒性甚至死亡的宽范围剂量梯度。
观察时间范围：急性毒性试验的主要观察期通常为连续14天，首次给药后需密切观察24-48小时。
性别范围：检测应同时包含雌雄两种性别的动物，以考察可能的性别差异。
年龄与体重范围：适用于符合实验动物标准的特定周龄和体重范围的健康成年动物。
毒性终点范围：检测终点包括死亡、可逆与不可逆的中毒体征、体重变化及器官损伤等。
适用法规范围：适用于药品、保健品、新食品原料等注册申报中所需的初步安全性评价。
研究类型范围：适用于经典LD50测定法、固定剂量法、上下法等不同设计类型的急性毒性研究。
霍恩氏法：一种利用剂量几何级数递增和少量动物的LD50测定方法，通过查表获得结果。
寇氏法：要求各组动物数相等，剂量按等比级数排列，死亡率呈正态分布，通过公式计算LD50及其可信限。
Bliss氏法：一种概率单位法，将死亡率转换为概率单位，用最小二乘法拟合剂量-反应曲线，计算精确的LD50。
固定剂量法：OECD推荐方法之一，不追求精确的LD50，而是通过观察预定的固定剂量下的毒性表现来分类毒性。
上下法（阶梯法）：适用于低死亡率样品，以前一只动物的反应决定下一只动物的给药剂量，高效估算LD50。
限量试验法：当受试物预期毒性很低时，采用一个较高的限定剂量（如2000mg/kg或5000mg/kg）进行试验。
临床观察评分法：制定标准化的观察清单和症状评分体系，对神经系统、自主神经系统、躯体运动等进行量化评价。
大体解剖规范操作法：按照标准的解剖学程序和检查顺序，对胸腔、腹腔主要脏器进行系统的肉眼观察和记录。
体重变化分析法：定期称重，计算体重增长值或增长率，并与对照组进行比较分析。
数据统计处理方法：采用相应的生物统计学软件（如SPSS, SAS）对LD50、体重、摄食量等数据进行处理和分析。
电子天平（高精度）：用于精确称量实验动物体重以及受试物和配制试剂的重量。
生物显微镜及成像系统：用于对病理组织切片进行初步的显微观察和图像采集记录。
动物代谢笼系统：用于单独饲养动物，并准确收集和测量其摄食量、饮水量及排泄物。
灌胃针及注射器：用于对小鼠、大鼠等实验动物进行精确的经口灌胃或注射给药。
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