肿瘤代谢重编程抑制测试

发布时间:2026-06-08 09:45:34

检测项目

葡萄糖摄取率测定:通过检测细胞对荧光葡萄糖类似物(如2-NBDG)的摄取量,量化评估肿瘤细胞糖酵解活性的抑制程度。

乳酸生成量检测:测量细胞培养上清中乳酸浓度,直接反映糖酵解途径的终产物输出是否被有效抑制。

ATP水平定量分析:检测细胞内ATP的总量变化,评估代谢抑制对细胞能量状态的整体影响。

耗氧率测定:使用 Seahorse 分析仪等设备实时监测细胞的氧气消耗速率,评价线粒体氧化磷酸化功能是否受损。

细胞外酸化率测定:实时监测细胞培养微环境中的酸化速率,是评估糖酵解活性的关键间接指标。

谷氨酰胺消耗检测:分析培养液中谷氨酰胺的残留量,评估肿瘤细胞对谷氨酰胺这一关键营养源的依赖性是否被阻断。

脂质合成速率检测:通过追踪放射性或稳定同位素标记的前体(如^14C-乙酸)掺入脂质的量,评估新生脂质合成途径的抑制效果。

核苷酸合成前体检测:测量细胞内一碳代谢产物(如丝氨酸、甘氨酸)及嘌呤、嘧啶前体的水平,评估核苷酸合成代谢是否被干扰。

活性氧水平检测:使用荧光探针(如DCFH-DA)检测细胞内ROS水平,代谢重编程的改变常伴随氧化还原状态的波动。

关键代谢酶活性测定:针对己糖激酶、丙酮酸激酶M2、异柠檬酸脱氢酶等特定代谢酶,进行其酶活性的定量分析。

检测范围

糖酵解通路:涵盖从葡萄糖摄入到丙酮酸/乳酸生成的完整代谢流程,是瓦博格效应的核心检测范围。

三羧酸循环:评估线粒体内乙酰辅酶A氧化及中间产物循环的效率与通量变化。

磷酸戊糖途径:检测该旁路途径的活跃度,关注其为生物合成提供NADPH和核糖前体的能力。

谷氨酰胺分解代谢:覆盖谷氨酰胺转化为α-酮戊二酸并进入TCA循环的回补过程。

脂肪酸合成与β氧化:同时监测新生脂肪酸的合成能力以及脂肪酸分解供能的过程。

氨基酸代谢网络:包括丝氨酸、甘氨酸、天冬氨酸等非必需氨基酸的合成与互变代谢。

一碳单位代谢:聚焦于叶酸循环和甲硫氨酸循环,为核苷酸和甲基化反应提供前体。

核苷酸合成代谢:涵盖嘌呤和嘧啶从头合成及补救合成途径的代谢物通量。

线粒体电子传递链功能:评估复合物I-V的活性及整体氧化磷酸化效率。

自噬与巨胞饮作用:检测细胞在代谢压力下通过自噬或摄取胞外蛋白进行营养补偿的能力。

检测方法

质谱代谢组学分析:采用液相色谱-质谱联用技术,对细胞内成百上千种代谢物进行无靶向或靶向定量分析。

Seahorse细胞能量代谢分析

C-13或N-15稳定同位素示踪技术:使用标记的葡萄糖、谷氨酰胺等底物,追踪特定原子在代谢网络中的流向与分布,计算代谢通量。

荧光/发光法底物检测

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

检测仪器设备

Seahorse XF系列细胞能量代谢分析仪

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

C-13或N-15稳定同位素示踪技术

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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