
细胞存活率测定:通过检测细胞代谢活性或膜完整性,定量评估芪衍生物处理后存活细胞的比例。
半数抑制浓度计算:计算抑制50%细胞增殖所需的芪衍生物浓度,是评价化合物效力的核心指标。
细胞形态学观察:在倒置显微镜下观察细胞形态变化,如皱缩、变圆、脱落等,直观判断毒性效应。
克隆形成能力检测:评估单个细胞在芪衍生物作用下持续分裂并形成细胞集落的能力,反映长期增殖抑制。
细胞周期分布分析:检测芪衍生物对细胞周期各时相分布的影响,判断其是否引起周期阻滞。
细胞凋亡检测:通过特定染色或流式细胞术,分析芪衍生物诱导细胞发生程序性死亡的情况。
线粒体膜电位检测:评估线粒体功能状态,是判断早期凋亡及能量代谢受损的关键指标。
活性氧水平测定:检测细胞内活性氧物种的含量,探究芪衍生物是否通过氧化应激途径发挥作用。
Caspase酶活性测定:检测凋亡执行关键蛋白酶Caspase的活性,确认凋亡通路是否被激活。
Western Blot蛋白表达分析:分析芪衍生物处理后,细胞周期、凋亡相关关键蛋白的表达水平变化。
天然芪类衍生物:如白藜芦醇及其糖苷、氧化白藜芦醇等,评估其天然来源的活性。
化学合成芪类衍生物:对天然芪类结构进行修饰得到的一系列新化合物,筛选更高活性或更低毒性的候选药物。
不同浓度梯度样品:设置从低到高多个浓度梯度的芪衍生物,以建立剂量-效应关系曲线。
不同作用时间点:检测芪衍生物处理细胞24小时、48小时、72小时等不同时间点的效应。
人源肿瘤细胞系:如肝癌HepG2细胞、乳腺癌MCF-7细胞、肺癌A549细胞等常用模型。
鼠源肿瘤细胞系:如小鼠黑色素瘤B16细胞、白血病P388细胞等,用于临床前研究。
正常细胞系对照:如人肝细胞LO2、人脐静脉内皮细胞HUVEC等,评估化合物的选择性毒性。
多药耐药肿瘤细胞:检测芪衍生物对具有耐药性肿瘤细胞的抑制效果,探索其逆转耐药潜力。
三维肿瘤球模型:在更接近体内肿瘤微环境的三维培养模型中,评估芪衍生物的渗透与抑制效果。
联合用药效应:检测芪衍生物与临床常用化疗药物联合使用时的协同、相加或拮抗效应。
MTT比色法:利用线粒体琥珀酸脱氢酶还原MTT形成紫色甲臜的原理,通过吸光度值反映细胞活性。
CCK-8法:基于水溶性四唑盐被细胞脱氢酶还原后颜色变化的原理,操作简便,灵敏度高。
SRB染色法:通过磺酰罗丹明B与细胞蛋白结合染色,测定细胞总蛋白含量来反映细胞数量。
台盼蓝排斥试验:利用活细胞膜完整性能排斥台盼蓝染料的特性,在显微镜下直接计数活细胞。
集落形成实验:将低密度接种的细胞经药物处理后培养较长时间,固定染色并计数形成的细胞集落。
流式细胞术PI染色法:用碘化丙啶染色并结合流式细胞仪分析,定量检测细胞周期分布。
Annexin V-FITC/PI双染法:通过流式细胞术区分活细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞及坏死细胞。
JC-1荧光探针法:利用JC-1探针在极化与去极化线粒体中荧光颜色的变化,检测线粒体膜电位。
DCFH-DA荧光探针法:利用无荧光的DCFH-DA被细胞内ROS氧化生成绿色荧光DCF的原理,检测ROS水平。
Caspase活性分光光度法:利用Caspase酶特异切割底物肽并释放生色基团,通过测定吸光度变化计算酶活性。
二氧化碳培养箱:为细胞培养提供恒定的温度、湿度和二氧化碳浓度环境。
超净工作台:提供无菌操作环境,用于细胞传代、加药等所有无菌实验步骤。
倒置相差显微镜:用于日常观察细胞生长状态、形态变化及进行台盼蓝染色计数。
酶标仪:用于读取MTT、CCK-8等比色或荧光实验的吸光度或荧光值,进行高通量检测。
流式细胞仪:用于细胞周期分析、细胞凋亡检测、线粒体膜电位及ROS水平的高通量快速分析。
荧光显微镜:用于观察JC-1、DCF等荧光探针标记的细胞,进行定性或半定量分析。
低速离心机:用于细胞悬液的收集、洗涤及重悬等常规操作。
电子分析天平:精确称量芪衍生物样品,用于配制母液及工作液。
多功能酶标仪:具备吸光、荧光、化学发光等多种检测模式,适用于多种检测方法的信号读取。
蛋白免疫印迹系统:包括电泳仪、转膜仪、化学发光成像仪等,用于Western Blot蛋白表达分析。
沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。
签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。
样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。
试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。
出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。
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