α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达：检测CAFs最经典的标志物，用于鉴定其活化状态和肌成纤维细胞亚型。
成纤维细胞活化蛋白（FAP）表达：评估CAFs表面特异性酶的表达水平，与肿瘤进展和免疫抑制密切相关。
血小板衍生生长因子受体（PDGFR-α/β）：检测CAFs表面关键的生长因子受体，参与其招募和活化信号通路。
胶原蛋白I/III合成与分泌：定量分析CAFs产生细胞外基质主要成分的能力，反映其促纤维化功能。
白细胞介素-6（IL-6）分泌水平：测定CAFs分泌的关键炎性细胞因子，评估其对肿瘤细胞增殖和免疫调节的影响。
转化生长因子-β（TGF-β）信号通路活性：分析CAFs中TGF-β通路关键分子（如Smad2/3磷酸化）的状态，这是其活化的核心途径。
细胞迁移与侵袭辅助能力：通过共培养模型评估CAFs促进肿瘤细胞迁移和侵袭的生物学功能。
血管内皮生长因子（VEGF）表达：检测CAFs促血管生成因子的表达，评价其支持肿瘤血管新生的作用。
代谢重编程分析：考察CAFs的糖酵解、谷氨酰胺代谢等代谢特征，揭示其能量供应角色。
单细胞转录组测序（scRNA-seq）：在单细胞水平全面解析CAFs的异质性，鉴定新的亚群及其特异性基因标记。
实体瘤组织样本：适用于肺癌、乳腺癌、结直肠癌、胰腺癌、前列腺癌等多种实体肿瘤的新鲜或石蜡包埋组织。
原代CAFs分离与培养：从手术或活检肿瘤组织中分离、纯化并培养原代CAFs，用于后续功能学研究。
CAFs条件培养基：收集CAFs培养上清，用于分析其分泌组学及对共培养细胞的影响。
肿瘤微环境空间分布：利用多重荧光技术分析CAFs在肿瘤组织不同区域（如侵袭前沿、坏死区）的分布与表型差异。
不同CAFs亚型鉴定：区分炎性CAFs（iCAFs）、肌成纤维细胞样CAFs（myCAFs）、抗原呈递CAFs（apCAFs）等不同功能亚型。
治疗前后动态监测：对比分析化疗、放疗、靶向治疗或免疫治疗前后患者样本中CAFs表型与功能的改变。
转移灶与原发灶对比：比较原发肿瘤和匹配的远处转移灶（如肝转移、骨转移）中CAFs特征的异同。
患者来源的异种移植（PDX）模型：在PDX模型组织中评估人源CAFs的存活、扩增及其对肿瘤生长的支持作用。
癌旁与正常组织对照：将肿瘤组织中的CAFs与配对癌旁组织或正常组织中的成纤维细胞进行对比分析。
血液与体液循环标志物：探索CAFs相关标志物（如FAP、特定胶原片段）在患者外周血或腹腔积液等体液中的水平。
免疫组织化学（IHC）与免疫荧光（IF）：在组织切片上原位检测CAFs特异性蛋白的表达与定位，是临床病理的常用方法。
流式细胞术（FCM）：对解离的单细胞悬液进行多色标记，快速定量分析CAFs表面标志物及细胞内信号分子。
Western Blot：检测CAFs裂解物中特定目标蛋白的表达水平及翻译后修饰（如磷酸化）。
酶联免疫吸附试验（ELISA）：定量检测CAFs条件培养基或患者血清中特定细胞因子、生长因子的分泌浓度。
实时荧光定量PCR（qPCR）：测定CAFs中特定基因的mRNA表达水平，用于快速筛选标志物。
RNA测序（RNA-seq）：全转录组分析，系统揭示CAFs的基因表达谱、信号通路激活状态及亚型特征。
Transwell共培养实验：通过非接触或接触式共培养体系，评估CAFs对肿瘤细胞迁移、侵袭能力的直接影响。
胶原收缩实验：将CAFs嵌入胶原凝胶中，通过测量凝胶面积收缩率来评估其重塑细胞外基质的能力。
质谱流式（CyTOF）与成像质谱流式（IMC）：利用金属标签抗体进行超高参数单细胞蛋白组分析，或在组织原位进行多靶标成像。
活细胞成像与延时摄影：使用共聚焦显微镜等设备，实时观察并记录CAFs与肿瘤细胞之间的动态相互作用。
病理切片扫描仪：用于将IHC/IF染色的组织切片数字化，便于定量分析和远程会诊。
流式细胞分析仪：进行多色流式细胞术分析，必备设备，用于CAFs的表型分选和功能分析。
激光共聚焦显微镜：用于高分辨率、多通道的免疫荧光图像采集和三维重建，分析CAFs的空间结构。
蛋白免疫印迹系统：包括电泳仪、转膜仪和化学发光成像仪，用于Western Blot检测。
酶标仪：读取ELISA等实验的吸光度值，实现分泌蛋白的快速定量。
实时荧光定量PCR仪：进行基因表达水平的精确定量分析。
高通量测序仪：如Illumina系列平台，用于执行RNA-seq、scRNA-seq等测序项目。
细胞培养与活细胞成像系统：提供稳定的培养环境并整合显微镜，用于长时间观察CAFs的动态行为。
质谱流式细胞仪（Helios/CyTOF）：实现单细胞水平超过40个参数的蛋白标志物同时检测。
生物分析仪（如Agilent Bioanalyzer）：用于评估RNA、DNA样本的质量，是进行高质量测序的前提。
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