
肿瘤驱动基因突变表达谱:检测与肿瘤发生发展直接相关的关键驱动基因(如EGFR, KRAS, BRAF等)的mRNA表达水平,评估其激活状态。
肿瘤增殖与凋亡相关基因:定量分析Ki-67、PCNA(增殖标志)及Bcl-2家族、Caspase家族(凋亡相关)基因的表达,评估肿瘤生长与死亡平衡。
肿瘤侵袭与转移相关基因:检测MMPs(基质金属蛋白酶)、VEGF(血管内皮生长因子)、E-cadherin等基因表达,评估肿瘤的转移潜能。
激素受体与靶向治疗相关基因:精确测定ER(雌激素受体)、PR(孕激素受体)、HER2等基因的mRNA表达量,指导内分泌治疗和靶向用药。
药物代谢与耐药相关基因:分析CYP450家族、ABC转运蛋白家族(如MDR1)等基因表达,预测化疗药物代谢效率及耐药风险。
肿瘤干细胞标志物基因:检测CD133、CD44、ALDH1等潜在肿瘤干细胞标志物的表达,探索肿瘤复发和治疗的根源。
细胞周期调控基因:定量Cyclin家族、CDK家族及p53等基因的表达,分析肿瘤细胞周期紊乱的分子机制。
免疫检查点分子基因:检测PD-L1、CTLA-4等免疫检查点分子的mRNA表达,为免疫治疗提供参考信息。
信号通路关键节点基因:分析PI3K/AKT、WNT、NOTCH等关键信号通路中核心基因的表达状态,描绘肿瘤信号网络特征。
内参基因:同步检测GAPDH、β-actin、18S rRNA等看家基因的表达,用于标准化目标基因的表达量,确保数据准确性。
实体肿瘤组织样本:适用于手术切除、穿刺活检获取的新鲜或石蜡包埋(FFPE)的各类实体瘤组织,如肺癌、乳腺癌、结直肠癌等。
血液循环肿瘤细胞(CTC)及ctDNA:可从外周血中分离CTC或提取ctDNA,进行无创或微创的基因表达分析,用于动态监测。
体液样本:适用于胸腔积液、腹水、脑脊液等体液中脱落细胞的基因表达检测,辅助诊断与病情评估。
细胞系与动物模型样本:用于肿瘤基础研究,分析不同处理条件下或转基因动物模型中肿瘤细胞的基因表达变化。
前病变与癌旁组织:对比分析癌前病变组织、肿瘤组织及癌旁正常组织的基因表达差异,研究肿瘤演进过程。
微小残留病灶(MRD)监测:通过超高灵敏度检测特定肿瘤标志基因的表达,评估治疗后体内是否存在微量残留肿瘤细胞。
肿瘤分子分型:基于多基因表达谱,将肿瘤划分为不同的分子亚型(如乳腺癌的Luminal A/B, HER2-enriched, Basal-like型),指导精准治疗。
预后评估标志物:检测与患者预后密切相关的基因表达组合,预测肿瘤的复发风险和患者生存期。
疗效预测与耐药监测:治疗前后动态监测特定基因的表达变化,预测药物疗效并早期发现耐药迹象。
药物作用机制研究:在临床前研究中,分析药物处理后肿瘤细胞基因表达谱的变化,阐明药物作用靶点与通路。
样本采集与处理:规范采集肿瘤组织或体液样本,立即液氮速冻或放入RNA稳定保存液中,防止RNA降解。
总RNA提取与纯化:使用柱式法或磁珠法试剂盒从样本中提取总RNA,并通过核酸定量仪测定其浓度与纯度(A260/A280)。
RNA完整性评估:采用琼脂糖凝胶电泳或生物分析仪检测RNA完整性(RIN值),确保RNA质量符合qPCR要求。
逆转录合成cDNA:使用高保真逆转录酶,以Oligo dT或随机引物将纯化的总RNA反转录为单链cDNA第一链。
引物与探针设计:针对目标基因的特定外显子区域,设计特异性引物及TaqMan探针或SYBR Green兼容引物,避免基因组DNA扩增。
qPCR反应体系配制:在冰上按比例混合cDNA模板、特异性引物/探针、荧光染料(或预混酶)及无核酸酶水,配制反应液。
实时荧光定量PCR扩增:将反应体系置于qPCR仪中,运行标准三步法(变性、退火、延伸)循环程序,实时采集荧光信号。
扩增曲线与熔解曲线分析:分析扩增曲线确定Ct值(循环阈值);若使用SYBR Green染料,需进行熔解曲线分析以验证扩增特异性。
相对定量分析:采用2^(-ΔΔCt)法,以内参基因校正后,计算目标基因在不同样本间的相对表达差异。
数据标准化与统计学分析:对定量结果进行标准化处理,并运用适当的统计学方法(如t检验、方差分析)比较组间差异的显著性。
实时荧光定量PCR仪:核心设备,具备多通道荧光检测能力,可同时检测FAM、HEX/VIC、ROX等多色荧光,实现多重检测。
核酸定量分析仪:用于精确测量提取的RNA或cDNA的浓度和纯度,是保证后续反应模板量准确的关键。
生物分析仪:一种微流控芯片系统,用于高效、自动化地评估RNA样本的完整性和质量,提供RIN值。
高速冷冻离心机:用于样本预处理、RNA提取过程中的细胞或组织碎片分离、沉淀核酸等步骤。
超微量分光光度计:适用于微量样本(如1μL)的核酸浓度与纯度快速检测,节省珍贵样本。
PCR超净工作台/生物安全柜:提供无菌无尘且防气溶胶污染的操作环境,用于配制对污染极度敏感的qPCR反应体系。
涡旋混合仪与掌上离心机:用于快速混匀微量反应管中的液体,并将管壁液体离心至管底,确保反应体系均一。
多通道移液器与电动分液器:提高加样效率和准确性,尤其适用于批量样本的cDNA制备或qPCR反应板制备。
低温冰箱(-20°C及-80°C):用于长期保存RNA样本、cDNA、引物探针及各类试剂,确保生物试剂的稳定性。
计算机与专业分析软件:配备仪器控制及数据分析专用软件,用于运行程序、采集荧光数据、计算Ct值及进行定量分析。
沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。
签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。
样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。
试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。
出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。
我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。






