细胞色素P450抑制试验

发布时间:2026-04-28 09:43:28

检测项目

CYP1A2抑制活性评估:评估待测物对代谢咖啡因、氯氮平等药物的CYP1A2同工酶的抑制潜力。

CYP2B6抑制活性评估:评估待测物对代谢依法韦仑、安非他酮等药物的CYP2B6同工酶的抑制潜力。

CYP2C8抑制活性评估:评估待测物对代谢瑞格列奈、紫杉醇等药物的CYP2C8同工酶的抑制潜力。

CYP2C9抑制活性评估:评估待测物对代谢华法林、甲苯磺丁脲等药物的CYP2C9同工酶的抑制潜力。

CYP2C19抑制活性评估:评估待测物对代谢奥美拉唑、氯吡格雷等药物的CYP2C19同工酶的抑制潜力。

CYP2D6抑制活性评估:评估待测物对代谢美托洛尔、右美沙芬等药物的CYP2D6同工酶的抑制潜力。

CYP2E1抑制活性评估:评估待测物对代谢对乙酰氨基酚、乙醇等物质的CYP2E1同工酶的抑制潜力。

CYP3A4抑制活性评估:评估待测物对代谢咪达唑仑、睾酮等底物的CYP3A4同工酶的抑制潜力,这是最关键的药物相互作用评估项目之一。

CYP3A5抑制活性评估:评估待测物对具有CYP3A5基因表达个体的代谢酶的抑制潜力,是CYP3A4抑制评估的重要补充。

时间依赖性抑制评估:检测待测物是否在NADPH存在下经代谢后产生更强或不可逆的抑制,这是药物相互作用风险评估的关键环节。

检测范围

新药候选化合物筛选:在药物发现早期,对大量化合物进行初步的CYP抑制筛选,以排除潜在的药物相互作用风险。

创新化学实体IND申报:为支持新药临床试验申请,提供全面的体外CYP抑制数据,是法规要求的核心内容。

仿制药一致性评价:评估仿制药与原研药在CYP酶抑制特性上是否一致,确保用药安全等效。

中药及天然产物安全性评价:评估中药复方、提取物或单体成分对CYP酶的抑制,预测其与化学药物合用的风险。

保健品及功能食品评估:评估保健品成分(如圣约翰草提取物、葡萄柚汁等)对药物代谢酶的潜在影响。

环境污染物毒性研究:研究多环芳烃、二噁英等环境污染物对CYP酶的抑制或诱导作用,评估其毒理学机制。

临床药物相互作用预测:基于体外抑制数据,通过模型预测体内药物相互作用的程度,指导临床联合用药方案。

代谢机制研究:作为工具,用于研究特定CYP同工酶的底物特异性、催化机制及抑制剂构效关系。

酶动力学参数测定:测定抑制常数、半数抑制浓度等关键动力学参数,定量表征抑制作用的强度。

药物代谢组学研究:作为代谢组学研究的一部分,系统性评估外源性物质对整体药物代谢网络的影响。

检测方法

重组人CYP酶孵育法:使用表达单一CYP同工酶的重组微粒体系统,特异性高,背景干扰小,是主流筛选方法。

人肝微粒体温孵法:使用混合的人肝微粒体,包含所有CYP同工酶,更接近体内生理环境,用于确认性实验。

肝细胞悬浮液孵育法:使用新鲜或冻存的人原代肝细胞,包含完整的酶系统和辅因子再生系统,数据更可靠。

荧光探针底物法:使用能被特定CYP酶代谢产生荧光产物的探针底物,通过荧光强度变化计算抑制率,适用于高通量筛选。

液相色谱-质谱联用法:使用特异性探针底物,经CYP酶代谢后,用LC-MS/MS精确测定代谢产物的生成量,是金标准方法。

发光法:利用某些探针底物代谢后产生发光物质(如荧光素)的原理进行检测,灵敏度高,操作简便。

预孵育实验:用于鉴别时间依赖性抑制,先将抑制剂与酶系统和NADPH预孵育一段时间,再加入探针底物。

IC50值测定:测定抑制剂的半数抑制浓度,通过设置一系列浓度的抑制剂,绘制浓度-抑制率曲线并计算IC50。

Ki值测定:测定抑制常数,通过在不同底物浓度下测定抑制率,使用Lineweaver-Burk或Dixon图等方法计算Ki值。

可逆性抑制鉴别实验:通过透析或稀释实验,判断抑制是否可逆,区分竞争性、非竞争性、反竞争性等抑制类型。

检测仪器设备

多功能酶标仪:用于荧光法、发光法或比色法检测,具备温控和振荡功能,是进行高通量筛选的核心设备。

高效液相色谱仪:用于分离孵育体系中的底物和代谢产物,常与质谱检测器联用,是代谢产物定量的基础设备。

三重四极杆质谱仪:与HPLC联用形成LC-MS/MS系统,提供高灵敏度、高特异性的定量分析,是行业标准检测设备。

恒温振荡培养箱:为体外温孵实验提供稳定且均匀的温度环境(通常37℃)及温和的振荡,确保反应均一进行。

超高效液相色谱仪:相比传统HPLC,具有更高分离度、更快分析速度和更低溶剂消耗,提升检测效率。

精密移液器与多通道移液器:用于精确移取微升级别的试剂、酶液、抑制剂和底物溶液,保证实验的准确性和重复性。

高速冷冻离心机:用于终止反应时沉淀蛋白,或制备肝微粒体、细胞匀浆等样品,需具备低温控制能力。

氮气吹干仪:用于浓缩或干燥经有机溶剂提取后的样品,以便于复溶和进行后续的仪器分析。

生物安全柜:在处理人源生物材料时提供无菌操作环境,保护操作人员和样品,防止交叉污染。

超低温冰箱:用于长期保存人肝微粒体、重组CYP酶、肝细胞及标准品等对温度敏感的试剂和样品。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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