急性经皮毒性试验

发布时间：2025-02-28 16:17:19

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检测方法

实验准备

实验动物：通常选用健康的成年大鼠、家兔或豚鼠等。动物体重应符合相应标准，大鼠一般为 180 - 220g，家兔为 2 - 3kg，豚鼠为 250 - 350g。动物需在实验环境中适应 3 - 5 天，实验前 24 小时对动物进行备皮，去除背部脊柱两侧的毛发，备皮面积约为体表面积的 10% - 15%。

受试物：受试物应具有代表性，尽量使用原药或原产品。对于液体受试物，可直接使用;对于固体受试物，需将其研磨成细粉，并根据需要配制成适当的剂型，如溶液、混悬液或乳剂等。

实验器材：准备好称量天平、注射器、移液器、染毒器具(如纱布、绷带等)、实验动物笼具、观察记录表格等。

剂量设计

一般设 3 - 5 个剂量组，同时设阴性对照组。剂量组的设置可根据预实验结果或参考类似化合物的毒性资料来确定。通常采用等比级数或等差级数设置剂量，相邻剂量组的比值一般为 2 - 4 倍。例如，最低剂量组可以是预计无毒性作用剂量的 1/2 或 1/3，最高剂量组应使部分动物出现明显的中毒症状甚至死亡，但不超过动物能耐受的最大剂量。

染毒方法

将受试物均匀涂布于动物的去毛皮肤上，用无刺激性的纱布或绷带固定，防止受试物脱落和动物舔食。染毒时间一般为 24 小时，对于一些不易清洗的受试物，染毒时间可适当延长至 48 小时或 72 小时。染毒结束后，用温水或适当的溶剂清洗动物皮肤，去除残留的受试物。

观察指标与时间

观察指标：染毒后应密切观察动物的中毒症状和死亡情况，包括皮肤刺激症状(如红斑、水肿)、全身症状(如精神状态、饮食、活动、呼吸、毛发等)以及特殊症状(如抽搐、流涎、腹泻等)。记录出现症状的时间、症状的发展过程和严重程度，以及动物的死亡时间和死亡数量。

观察时间：一般观察 14 天。在染毒后的前 3 天，应每天多次观察动物的情况，之后可每天观察 1 - 2 次。如果在 14 天内动物出现明显的中毒症状或死亡，应延长观察时间，直至动物的中毒症状稳定或死亡动物的数量不再增加。

数据处理与结果评价

计算半数致死量(LD50)：根据观察到的各剂量组动物的死亡情况，采用统计学方法计算受试物的 LD50 及其 95% 可信区间。常用的计算方法有 Bliss 法、概率单位法等。

评价毒性等级：根据计算得到的 LD50 值，按照相关标准对受试物的急性经皮毒性进行分级。例如，我国《化学品分类和标签规范第 10 部分：急性毒性》规定，LD50>2000mg/kg 为低毒，LD50 在 200 - 2000mg/kg 之间为中等毒，LD50 在 20 - 200mg/kg 之间为高毒，LD50≤20mg/kg 为剧毒。

适用范围

农药、杀虫剂、除草剂、杀菌剂、植物生长调节剂、化妆品、护肤品、洗发水、沐浴露、洗面奶、面霜、乳液、唇膏、指甲油、染发剂、烫发剂、脱毛膏、驱蚊液、蚊香、花露水、空气清新剂、消毒剂、清洁剂、洗衣液、洗衣粉、洗洁精、漂白剂、皮革护理剂、家具清洁剂、地板蜡、汽车清洁剂、防锈剂、润滑油、涂料、油漆、油墨、胶水、胶带、塑料、橡胶、树脂、纺织品、服装、鞋类、人造革、农药中间体、医药中间体、兽药、饲料添加剂、香料、香精、食品添加剂、工业化学品、危险化学品、日用化学品、纳米材料、生物制剂、基因工程产品、转基因产品、放射性物质、陶瓷原料、金属盐类、表面活性剂、催化剂、防腐剂、抗氧化剂、增塑剂、阻燃剂、发泡剂、固化剂、光敏剂、光引发剂等。