蛋白泛素化实验检测

  发布时间:2025-07-12 12:06:09

检测项目

泛素化位点鉴定:通过质谱技术识别蛋白质赖氨酸位点修饰;检测参数包括修饰位点坐标、肽段序列覆盖率

泛素链类型分析:解析泛素分子连接方式;检测参数包含K48/K63链占比、线性链丰度

修饰程度定量:测定目标蛋白泛素化水平;检测参数采用相对荧光强度或同位素比值

去泛素化酶活性:监测DUB酶催化效率;检测参数含酶解速率常数、底物消耗量

E3连接酶特异性:验证泛素转移酶作用靶点;检测参数记录底物结合常数、反应时间进程

泛素-蛋白酶体降解:跟踪底物蛋白降解动态;检测参数包含半衰期、降解产物积累量

多聚泛素化检测:分析链长分布特征;检测参数含高分子量复合物迁移率

泛素化动力学:测定修饰反应速率;检测参数采用时间梯度样本的修饰率变化

单泛素化与多泛素化区分:识别修饰分子数量;检测参数依据分子量位移差异

泛素结合域互作:验证受体蛋白识别能力;检测参数包含结合解离常数、复合物稳定性

检测范围

细胞裂解液样本:包含哺乳动物细胞或细菌表达系统提取物

重组蛋白体系:纯化后的目标蛋白与泛素化酶混合物

组织匀浆样本:来自疾病模型的脑/肝/肾组织提取液

体外翻译产物:无细胞表达系统合成的靶蛋白

免疫沉淀复合物:抗体捕获的蛋白-泛素结合物

临床病理标本:肿瘤组织切片中的泛素化标志物

药物筛选模型:小分子抑制剂处理的细胞样本

转基因生物样本:过表达泛素化酶系的小鼠组织

亚细胞组分:分离的细胞核/线粒体/胞浆蛋白

病毒宿主互作体系:感染过程中的病毒蛋白修饰

检测标准

ISO20184-1:2016蛋白质修饰检测通用要求

GB/T34800-2017蛋白质翻译后修饰检测指南

ASTME3068-17质谱法鉴定蛋白修饰标准流程

ISO21378:2020免疫印迹定量分析规范

GB/T39530-2020细胞信号通路检测通则

ISO19685:2021蛋白酶体活性测定基准方法

检测仪器

高分辨质谱仪:精确测定分子量偏移,用于泛素化位点定位

荧光成像系统:实时监测活细胞泛素化过程,具备多通道捕获能力

毛细管电泳装置:分离修饰/未修饰蛋白变体,分辨率为0.01Da

表面等离子共振仪:量化蛋白质互作亲和力,检测限达pM级

微量热泳动仪:测定酶促反应热力学参数,温度控制精度±0.1℃

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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