DNA-蛋白质相互作用验证检测

  发布时间:2025-05-08 13:42:06

检测项目

DNA-蛋白质相互作用验证检测包含三大核心项目:

结合位点鉴定:通过染色质免疫沉淀测序(ChIP-seq)或DNA足迹法确定蛋白质在DNA链上的特异性结合区域

结合亲和力测定:采用表面等离子体共振(SPR)或等温滴定量热法(ITC)量化相互作用强度

动态互作分析:利用荧光共振能量转移(FRET)或单分子追踪技术研究实时结合动力学

结构解析:通过X射线晶体学或冷冻电镜获取复合物三维构象信息

检测范围

本检测适用于以下研究领域:

转录因子与启动子/增强子区域的特异性识别

表观遗传调控蛋白与甲基化/乙酰化DNA的相互作用

DNA修复酶与损伤位点的动态结合过程

病毒整合酶与宿主基因组的整合机制研究

抗癌药物与DNA-蛋白复合物的干扰效应评估

适用样本涵盖原代细胞、肿瘤组织切片、重组蛋白体系及合成DNA探针等多种类型。

检测方法

经典生化分析法

电泳迁移率变动分析(EMSA):基于蛋白-DNA复合物在凝胶电泳中的迁移差异进行定性检测

DNase I足迹实验:通过核酸酶保护效应定位精确结合位点

Southwestern blotting:膜固定蛋白与标记DNA探针的特异性结合检测

高通量测序技术

ChIP-seq技术流程:

甲醛交联固定DNA-蛋白复合物

超声破碎获取200-500bp染色质片段

特异性抗体免疫沉淀目标复合物

建库测序及生物信息学分析

CUT&Tag技术:通过Tn5转座酶实现靶向染色质片段化与测序文库构建

生物物理表征技术

表面等离子体共振(SPR):实时监测结合/解离动力学参数(ka, kd, KD)

微量热泳动(MST):基于荧光信号变化测定溶液环境中的结合常数

原子力显微镜(AFM):纳米级分辨率观测复合物形貌特征

检测仪器

所有仪器均需定期进行计量校准,其中光学类设备需每季度进行光路校正,流体控制系统每月执行流速精度验证。实验环境应维持温度22±1℃、湿度40-60%的恒温恒湿条件。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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