代谢稳定性评估：测定化合物在孵育体系中的半衰期或清除率，预测其在体内的留存时间。
代谢产物鉴定：识别并解析化合物经代谢酶作用后生成的主要和次要代谢产物结构。
代谢表型研究：确定参与化合物代谢的主要CYP450亚型（如CYP3A4， CYP2D6等）或其他酶系。
酶动力学参数测定：计算代谢反应的米氏常数（Km）和最大反应速率（Vmax），评估代谢效率。
时间依赖性抑制评估：检测化合物是否对代谢酶产生时间依赖性的不可逆或准不可逆抑制。
可逆性抑制评估：评估化合物对代谢酶的可逆性抑制作用，测定抑制常数（Ki）。
酶诱导潜力研究：通过检测报告基因活性或酶活性/蛋白表达量，评估化合物对代谢酶的诱导作用。
跨物种代谢比较：比较化合物在人、大鼠、犬、猴等不同种属肝微粒体或肝细胞中的代谢差异。
血浆蛋白结合率测定：评估化合物与血浆蛋白的结合程度，因其影响游离药物浓度及代谢速率。
代谢-转运体相互作用：研究代谢过程与药物外排或摄入转运体之间的潜在相互影响。
Ⅰ相代谢产物：涵盖氧化、还原、水解等反应生成的产物，如羟基化、脱烷基化代谢物。
Ⅱ相代谢产物：涵盖结合反应产物，如葡萄糖醛酸结合物、硫酸结合物、谷胱甘肽结合物等。
活性代谢物：重点关注具有药理活性或毒理学活性的代谢产物。
反应性代谢物：检测可能引发药物毒性（如肝毒性）的活性中间体，常通过捕获实验进行。
CYP450酶代谢物：专门针对由细胞色素P450超家族酶系催化生成的所有代谢物。
非CYP450酶代谢物：涵盖由酯酶、酰胺酶、黄素单加氧酶、醛氧化酶等催化的代谢产物。
特定手性代谢物：对具有手性中心的原药或其代谢产物进行立体选择性代谢分析。
微量代谢物：利用高灵敏度仪器检测含量极低但可能关键的代谢产物。
未知结构代谢物：通过高分辨质谱等技术，对结构未知的代谢物进行推测和鉴定。
代谢软点：识别分子中最易发生代谢修饰的位点，为先导化合物结构优化提供依据。
肝微粒体温孵法：将化合物与肝微粒体及辅因子共孵育，是评估Ⅰ相代谢的经典方法。
肝细胞孵育法：使用原代肝细胞或肝细胞系，能同时反映Ⅰ相和Ⅱ相代谢，更接近体内环境。
重组CYP450酶法：使用单一亚型的重组人CYP450酶，用于精确的代谢表型分析和抑制研究。
肝S9组分孵育法：使用包含胞质和微粒体酶的S9组分，适用于同时需要Ⅰ/Ⅱ相代谢的初步筛选。
LC-MS/MS联用技术：液相色谱串联质谱是代谢物定性与定量分析的核心技术，具有高灵敏度和特异性。
高分辨质谱分析：采用Q-TOF、Orbitrap等高分辨质谱精确测定代谢物分子量，推测其分子式与结构。
放射性标记示踪法：使用放射性同位素标记的化合物，便于全面追踪代谢途径和进行物料平衡研究。
荧光或发光底物法：使用特异性荧光/发光探针底物，快速测定CYP450酶的活性及抑制/诱导效应。
免疫印迹与qPCR：用于在蛋白和mRNA水平上检测代谢酶的表达量，评估酶诱导作用。
谷胱甘肽捕获实验：通过添加谷胱甘肽来捕获反应性代谢中间体，评估化合物产生活性中间体的潜力。
高效液相色谱仪：用于复杂生物样品中化合物及其代谢物的分离，常与质谱联用。
三重四极杆质谱仪：进行代谢物定量和常规定性分析的核心设备，具有优异的灵敏度和重复性。
高分辨飞行时间质谱仪：提供精确分子量信息，用于未知代谢物的结构鉴定和推测。
轨道阱高分辨质谱仪：兼具高分辨率和高质量精度，是代谢产物鉴定的高端平台。
恒温振荡培养箱：为肝微粒体、肝细胞等体外孵育实验提供恒温及温和混匀的环境。
超高效液相色谱：相比传统HPLC，具有更高分离度、更快速度和更低溶剂消耗，提升分析通量。
液体处理工作站：实现孵育样品制备、加样、淬灭等步骤的自动化，提高实验效率和重现性。
闪烁计数仪用于检测放射性标记实验中样品的放射性强度，进行代谢物的定量和物料平衡计算。
多功能酶标仪：用于读取基于荧光或发光原理的CYP450酶活性检测实验的信号。
实时荧光定量PCR仪：精确测定代谢酶mRNA的表达水平，评估药物对酶基因的诱导作用。
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