检测项目
粗多糖检测体系包含以下核心指标：
- 总糖含量测定：通过苯酚-硫酸法或蒽酮-硫酸法测定样品中总还原糖含量
- 单糖组成分析：采用气相色谱（GC）或高效液相色谱（HPLC）解析葡萄糖、半乳糖等单糖比例
- 分子量分布测定：使用凝胶渗透色谱（GPC）结合多角度激光光散射检测器（MALLS）表征多糖分子量
- 杂质检测：包括蛋白质残留（考马斯亮蓝法）、灰分测定（灼烧法）及重金属限量检验
- 功能特性评价：涉及溶解度、粘度特性及抗氧化活性等附加分析项目
检测范围
本检测方案适用于以下样品类型：
| 样品类别 | 典型代表 |
|---|
| 植物提取物 | 灵芝多糖、枸杞多糖、黄芪多糖等药用植物提取物 |
| 食品原料 | 膳食纤维制品、食用菌多糖、海藻多糖等 |
| 医药中间体 | 注射级多糖原料、药用辅料等 |
| 保健产品 | 口服液、胶囊剂型中的活性多糖成分 |
| 工业原料 | 微生物发酵产物中的胞外多糖组分 |
检测方法
总糖含量测定体系
- 苯酚-硫酸法（GB/T 15672）
- 原理：浓硫酸使多糖水解为单糖并脱水生成糠醛衍生物，与苯酚显色形成橙黄色化合物
- 波长选择：490nm处测定吸光度值
- 标准曲线：葡萄糖标准品建立5点校准曲线（0-100μg/mL）
- 蒽酮-硫酸法（ISO 11292）
- 适用场景：含淀粉等多糖复合物的样品体系
- 显色条件：沸水浴加热10分钟后立即冰浴终止反应
- 干扰控制：需预先去除样品中的还原性干扰物质
单糖组成分析技术路线
样品前处理 → 酸水解（三氟乙酸,121℃,2h） → 衍生化（硅烷化试剂） → GC-FID分析
├─色谱柱选择：DB-5MS毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）
├─程序升温：150℃→280℃（5℃/min）
└─定量方式：内标法（肌醇作为内标物）
分子量测定标准流程
- GPC-MALLS联用系统参数设置
- - 流动相：0.1M NaNO3 + 0.02% NaN3
- - 柱温箱温度：35±0.1℃
- - 流速控制：0.5mL/min（示差折光检测器需稳定30min）
- 数据解析要点
- * dn/dc值设定：根据多糖类型采用0.146-0.155默认值或实测校正值
* Berry拟合模型计算绝对分子量
* 多分散系数PDI需控制在1.5以下视为合格
检测仪器
紫外可见分光光度计（UV-Vis）
技术参数要求：
- 波长范围：190-1100nm（需配置石英比色皿）
- 光度重复性：≤0.0003Abs（在340nm处测试）
- 基线平直度：±0.001Abs（200-900nm扫描）
高效液相色谱系统（HPLC）
关键组件配置：
| 模块 | 规格要求 |
|---|
| 泵系统 | 四元梯度泵，压力脉动＜1% |
| 柱温箱 | -10℃至80℃控温精度±0.1℃ |
| 检测器阵列 | DAD+ELSD双模式联用配置 |
凝胶渗透色谱仪（GPC）
注：需定期使用聚乙二醇标准品进行柱效验证
当理论塔板数＜8000 plates/m时应启动柱再生程序
配套色谱柱规格：TSKgel G4000PWxL,7.8mmID×30cm,13μm粒径
最大耐受压力：3.5MPa（35bar）
分子量分离范围：1×103-8×105Da
微波消解工作站（重金属检测用）
- 配备16位高压消解罐组（TFM材质内衬）
最高工作温度：300℃/压力80bar - 梯度升温程序设置要求：
- 阶段1:10min升温至180℃（保持15min）
-功率限制≤1600W - 阶段2:5min升温至210℃（保持20min）
-压力监控阈值设定为75bar
