pcr产物电泳检测

  发布时间:2025-06-30 10:42:09

检测项目

片段长度判定:通过DNA Ladder参照比对,分辨率±5bp,检测范围100-10000bp

产物特异性验证:识别非特异性条带,杂带检出限≤20ng

浓度半定量分析:基于SYBR® Green I荧光强度,线性范围0.1-100ng/μl

拖尾现象检测:评估DNA降解程度,片段拖尾率≤15%为合格

引物二聚体识别:检测100bp以下异常条带,灵敏度阈值5pg

阳性对照一致性:标准品条带位置偏差≤2mm

阴性对照洁净度:杂信号强度需低于主带5%

凝胶均匀度检验:溴酚蓝前沿波动范围±0.5cm

电泳分离效率:相邻条带间距≥3mm(200bp差异)

核酸染料灵敏度:EB替代染料最低检出限0.5ng

电压梯度优化:推荐80-120V恒定电压,迁移速率0.5-1cm/h

上样缓冲液性能:蔗糖浓度40%±2%,溴酚蓝迁移率校正系数0.6

检测范围

基因克隆验证:重组质粒插入片段长度确认,误差±2%

突变检测分析:RFLP酶切产物分型,片段差异≥50bp可辨

微生物鉴定:16S rRNA PCR产物指纹图谱,条带数量≥5

转基因检测:外源基因片段筛查,最低检出量0.1%

法医DNA分型:STR位点扩增产物复核,等位基因判读一致性≥99%

病原体诊断:病毒特异性基因扩增,假阴性率≤0.1%

SNP基因分型:ARMS-PCR产物检测,杂合子双带分离度≥3mm

甲基化研究:MSP产物电泳,甲基化/非甲基化条带间距≥5mm

RNA质检:RT-PCR产物完整性验证,28S/18S比值≥1.8

NGS文库构建:接头连接效率评估,主带占比≥80%

基因编辑验证:CRISPR靶向切割效率分析,突变条带强度比≥30%

环境DNA检测:宏基因组PCR产物质检,嵌合体率≤2%

检测标准

ISO 22174:2005 食源病原体PCR检测通用要求

GB/T 37876-2019 核酸定量检测用琼脂糖凝胶电泳通则

ASTM E1873-2006 生物技术分离过程电泳标准指南

YY/T 1596-2017 甲型流感病毒核酸检测试剂盒

ISO 17822:2020 体外诊断PCR产物分析规范

GB/T 34796-2017 核酸染料性能检测方法

EP7-A2 临床实验室标准委员会电泳指南

ISO 20166-3:2018 分子体外诊断标本要求

GB/T 38505-2020 消毒剂PCR抑制效应检测

ISO 20395:2019 生物技术PCR引物设计验证规范

SN/T 3582-2013 转基因产品电泳检测方法

JJF 1825-2020 核酸电泳仪校准规范

检测仪器

水平电泳槽:配置10×14cm凝胶托盘,实现8-12样本并行分离,缓冲液循环量≥200ml

稳压稳流电泳仪:输出电压范围5-300V,电流精度±1mA,支持定时自动切断

蓝光透射仪:470nm激发波长,配备SYBR® Green专用滤光片,灵敏度0.1ng/μl

凝胶成像系统:1600万像素CCD,动态范围4.8OD,标配DNA定量分析软件

微波琼脂糖融化仪:功率范围100-800W,温度控制精度±2℃,防暴沸设计

微量分光光度计:检测波长260/280nm,样本容积0.3-2μl,DNA浓度检测限2ng/μl

自动上样器:96孔板兼容设计,加样精度±0.1μl,交叉污染率<0.01%

恒温循环水浴槽:控温范围4-99℃,凝胶凝固温度保持±0.5℃偏差

紫外安全操作台:254nm波长防护,配备自动关闭联动装置

电泳迁移分析软件:支持泳道自动识别,分子量计算偏差≤1.5%

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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