岩藻糖基化位点质谱分析

发布时间:2026-05-08 09:30:06

检测项目

核心岩藻糖基化鉴定:确认蛋白质上是否存在岩藻糖修饰,是分析的首要目标。

岩藻糖基化位点定位:精确鉴定岩藻糖修饰发生在蛋白质肽链的哪个特定氨基酸残基上。

岩藻糖连接类型分析:区分岩藻糖是以α-1,2、α-1,3、α-1,4、α-1,6等何种糖苷键连接到核心结构上。

岩藻糖基化程度定量:测量特定位点或整个蛋白质上岩藻糖修饰的丰度或占有率。

岩藻糖基化异质性分析:分析同一蛋白质位点上存在的不同岩藻糖基化结构变体。

N-糖链岩藻糖基化分析:专注于分析连接在天冬酰胺上的N-连接糖链中的岩藻糖修饰,特别是核心岩藻糖。

O-糖链岩藻糖基化分析:分析连接在丝氨酸/苏氨酸上的O-连接糖链中是否存在岩藻糖修饰。

岩藻糖基化与去岩藻糖基化比例:在生物制药中,关键评估治疗性抗体等产品中岩藻糖基化与非岩藻糖基化糖型的相对比例。

岩藻糖基化结构解析:对含有岩藻糖的完整糖链结构进行深入解析,包括糖序列和连接方式。

岩藻糖基化动态变化监测:研究在不同生理、病理条件或生产过程中,岩藻糖基化模式的动态变化。

检测范围

治疗性单克隆抗体:重点检测其Fc段N-糖链上的核心岩藻糖,这与抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用密切相关。

血浆/血清糖蛋白:分析如甲胎蛋白、免疫球蛋白等疾病标志物中的异常岩藻糖基化模式。

细胞膜表面糖蛋白:研究细胞表面受体、粘附分子等的岩藻糖基化在细胞识别和信号转导中的作用。

分泌型糖蛋白:检测细胞培养上清或体液中的可溶性糖蛋白的岩藻糖修饰。

组织或细胞裂解液:从复杂生物样本中系统性地鉴定和定量岩藻糖基化蛋白质及其位点。

重组糖蛋白药物:对除抗体外的其他重组治疗性糖蛋白进行岩藻糖基化质量属性监控。

植物和微生物糖蛋白:研究不同表达系统产生的糖蛋白中特有的岩藻糖基化形式。

外泌体糖蛋白:分析外泌体表面糖蛋白的岩藻糖基化特征,探索其作为液体活检标志物的潜力。

特定糖基转移酶或糖苷酶产物:评估FUT等岩藻糖基转移酶或岩藻糖苷酶的酶活性和特异性。

糖链标准品或合成寡糖:对已知结构的岩藻糖基化糖链标准品进行质谱验证和表征。

检测方法

基于质谱的糖蛋白质组学:通过液相色谱-串联质谱对蛋白酶解后的糖肽进行分析,实现位点特异性鉴定。

释放糖链的质谱分析:使用PNGase F等酶或化学方法释放N-糖链,对游离糖链进行质谱分析以研究岩藻糖修饰。

亲水相互作用色谱富集:利用HILIC材料选择性富集糖肽,提高岩藻糖基化肽段的质谱检测灵敏度。

凝集素亲和富集:使用如AAL、LCA等对岩藻糖有特异亲和力的凝集素来富集岩藻糖基化糖肽或糖蛋白。

串联质谱碎裂技术:应用CID、HCD、ETD等多种碎裂模式,获取糖肽的肽段序列和糖链结构信息。

多反应监测/平行反应监测:采用MRM/PRM靶向质谱方法,对已知的岩藻糖基化位点进行高灵敏度、高重复性的绝对或相对定量。

糖链衍生化策略:对释放的糖链进行甲基化、还原胺化标记等,以改善其质谱离子化效率或色谱分离行为。

电子活化解离技术:应用EThcD或ETciD等电子基碎裂技术,更好地保留糖链在肽段上的连接信息,实现更准确的位点定位。

离子淌度质谱分析:整合离子淌度分离,根据糖肽的碰撞截面积差异进行分离,降低谱图复杂度并提高鉴定可信度。

完整蛋白质/糖蛋白质谱分析:在高分辨率质谱上分析完整或经过有限酶切的糖蛋白,获取岩藻糖基化糖型的整体分布信息。

检测仪器设备

高分辨率串联质谱仪:如Q-Exactive系列、Orbitrap Fusion系列,提供高质量精度和分辨率,用于糖肽的鉴定和定量。

纳升液相色谱系统:与质谱联用,实现糖肽的高效分离,尤其适用于微量复杂样品的分析。

亲水相互作用液相色谱柱:专门用于糖肽或游离糖链的色谱分离,是糖蛋白质组学的关键分离工具。

凝集素亲和色谱柱/芯片:用于自动化或手动富集岩藻糖基化糖蛋白/糖肽的固相材料。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱:MALDI-TOF/TOF MS,常用于释放糖链的快速质量数测定和初步结构分析。

配备离子淌度组件的质谱仪:如timsTOF、Select Series Cyclic IMS等,提供额外的离子淌度分离维度。

超高效液相色谱系统:用于快速、高效的糖肽或糖链分离,提高整体分析通量。

自动化样品前处理工作站

糖链自动释放与标记设备:实现从糖蛋白中自动化释放N-糖链、O-糖链并进行荧光标记的集成化设备。

数据处理与解析软件:如Byonic、pGlyco、GPQuest等专门用于糖蛋白质组学数据搜库和糖链结构解析的专业软件。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

本文链接:https://test.yjssishiliu.com/qitajiance/97043.html
获取最新报价
中析研究所为您提供科学严谨的测试试验方案
推荐检测

400-640-9567

北京中科光析科学技术研究所

投诉举报:010-82491398

企业邮箱:010@yjsyi.com

地址:北京市丰台区航丰路8号院1号楼1层121

山东分部:山东省济南市历城区唐冶绿地汇中心36号楼

北京中科光析科学技术研究所 京ICP备15067471号-11