
DNA甲基化水平:测定基因组DNA中5-甲基胞嘧啶(5-mC)的总体含量,反映全局甲基化状态。
特定基因位点甲基化状态:针对特定基因的启动子或调控区域,分析其CpG岛等区域的甲基化程度。
羟甲基化衍生物含量:检测5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)等氧化衍生物的水平,涉及去甲基化过程。
甲酰基胞嘧啶含量:测定5-甲酰基胞嘧啶(5-fC)的含量,作为DNA主动去甲基化的中间产物。
羧基胞嘧啶含量:测定5-羧基胞嘧啶(5-caC)的含量,是DNA去甲基化通路的终末产物。
RNA甲基化修饰:检测如m6A(N6-甲基腺苷)等RNA甲基化修饰的水平与分布。
组蛋白甲基化修饰:分析组蛋白H3、H4等特定赖氨酸或精氨酸位点的甲基化状态。
小分子代谢物甲基化:检测如神经递质、激素等小分子经过甲基转移酶催化后的甲基化产物。
蛋白质甲基化修饰:测定特定蛋白质上赖氨酸或精氨酸残基的甲基化修饰水平。
甲基化中间体稳定性:评估在制备过程中产生的各类甲基化或去甲基化中间体的化学稳定性。
动物组织与细胞:适用于从动物(如小鼠、大鼠)组织样本或培养细胞系中提取的核酸和蛋白质。
植物组织:适用于各类植物叶片、根、茎等组织的基因组DNA甲基化分析。
血液样本:适用于全血、血清、血浆或分离的外周血单个核细胞中的循环核酸甲基化检测。
微生物基因组:适用于细菌、真菌等微生物基因组中特定模式的甲基化修饰研究。
临床病理标本:适用于福尔马林固定石蜡包埋组织切片中的DNA甲基化回溯性研究。
环境样本:适用于从土壤、水体等环境样本中提取的微生物群落DNA的甲基化分析。
体外合成寡核苷酸:适用于含有特定修饰碱基的合成DNA/RNA链的甲基化衍生物制备与验证。
细胞核内染色质:适用于从细胞核中分离的染色质,用于组蛋白甲基化与DNA甲基化的关联分析。
亚细胞器组分:适用于分离的线粒体、叶绿体等细胞器内的核酸甲基化研究。
药物与化学试剂:适用于经过生物或化学方法甲基化修饰的小分子药物或化合物。
重亚硫酸盐测序:利用重亚硫酸盐处理DNA,将未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶,通过测序区分甲基化位点。
高效液相色谱法:通过HPLC分离核酸酶解后的单核苷酸,定量检测甲基化胞嘧啶等修饰碱基。
质谱联用技术:采用LC-MS/MS或MALDI-TOF MS对甲基化修饰的核苷、核苷酸或肽段进行高灵敏度定性与定量。
甲基化特异性PCR:根据重亚硫酸盐处理后的序列差异设计引物,特异性扩增甲基化或非甲基化的DNA片段。
甲基化DNA免疫共沉淀:使用抗5-mC或5-hmC等特异性抗体富集甲基化DNA片段,结合芯片或测序进行分析。
焦磷酸测序:基于测序引物延伸时掺入的dNTP释放焦磷酸信号,实时定量单个CpG位点的甲基化水平。
限制性内切酶法:利用对甲基化状态敏感的限制性内切酶切割DNA,通过电泳或PCR判断甲基化状态。
化学衍生化结合检测:使用特定化学试剂将甲基化/羟甲基化标记转化为可被荧光或生物素捕获的衍生物。
薄层色谱法:用于分离和初步鉴定核酸酶解产物或小分子甲基化代谢物。
酶联免疫吸附法:使用针对特定甲基化修饰(如5-mC, m6A)的抗体进行间接定量检测。
高效液相色谱仪:用于分离和纯化甲基化衍生物,常配备紫外或荧光检测器。
液相色谱-串联质谱联用仪:用于高灵敏度、高特异性地定性和定量分析各类甲基化修饰分子。
下一代测序仪:用于全基因组甲基化测序、靶向甲基化测序等大规模、高通量分析。
实时荧光定量PCR仪:用于进行甲基化特异性PCR或基于探针的甲基化定量分析。
焦磷酸测序仪:专门用于进行焦磷酸测序,实现单个位点甲基化水平的精确定量。
毛细管电泳仪:用于分析重亚硫酸盐处理后的PCR产物片段大小,判断甲基化状态。
微阵列芯片扫描仪
:用于读取MeDIP-chip或类似技术中芯片杂交后的信号,获得甲基化图谱。酶标仪:用于读取ELISA等基于微孔板的甲基化免疫检测实验的吸光度或荧光信号。
薄层色谱展开与成像系统:包括展开缸、薄层板及紫外成像系统,用于TLC分析。
核酸/蛋白凝胶电泳系统:包括电泳槽、电源和凝胶成像系统,用于分析酶切或PCR产物。
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