抗氧化ORAC测定

发布时间:2026-03-28 20:26:12

检测项目

总抗氧化能力(ORAC值):测定样品对过氧自由基(ROO·)的综合清除能力,以Trolox当量表示,是核心评价指标。

水溶性抗氧化成分:检测样品中溶于水的抗氧化物质,如维生素C、多酚类、部分黄酮等的抗氧化贡献。

脂溶性抗氧化成分:检测样品中溶于脂类的抗氧化物质,如维生素E、类胡萝卜素、番茄红素等的抗氧化活性。

过氧自由基清除率:在特定时间点,样品对过氧自由基的清除效率百分比,反映其作用速度与强度。

抗氧化反应动力学曲线:监测整个反应过程中荧光衰减的完整曲线,用于分析抗氧化作用的时效关系。

Trolox当量浓度:以水溶性维生素E类似物Trolox为标准品,计算样品与之等效的抗氧化浓度。

荧光衰减曲线下面积(AUC):通过计算荧光探针荧光衰减曲线与基线之间的净面积,量化抗氧化保护效果。

抗氧化成分协同效应:评估样品中多种抗氧化物质共同作用时,是产生叠加、协同还是拮抗效应。

单位质量/体积抗氧化能力:计算每克固体样品或每毫升液体样品所具有的ORAC值,用于不同样品间比较。

抗氧化活性稳定性:考察样品在经过加工、储存或不同pH、温度条件下,其ORAC值的变化情况。

检测范围

新鲜水果与蔬菜:如蓝莓、草莓、菠菜、西兰花等,评估其天然抗氧化物质的含量与活性。

各类植物提取物:包括茶叶提取物、葡萄籽提取物、松树皮提取物等保健品原料。

功能性食品与保健品:如口服液、胶囊、片剂等,用于产品功效宣称的量化支持与质量控制。

食用油与脂肪制品:测定油脂的氧化稳定性,评估其内在抗氧化成分或添加的抗氧化剂效果。

饮料制品:如果汁、茶饮、葡萄酒、功能性饮料等液态产品的抗氧化能力评价。

谷物与豆类:检测全谷物、豆类及其加工产品中的抗氧化物质,如酚酸、黄酮等。

中草药与香料:评估传统药材和食用香料(如姜黄、肉桂)的抗氧化活性成分。

动物组织与体液:如血清、血浆、肝脏匀浆等,用于营养学或药理学研究中机体抗氧化状态的评估。

化妆品原料:检测具有抗氧化宣称的护肤成分,如辅酶Q10、艾地苯、植物精华等。

食品添加剂:对人工或天然抗氧化剂(如BHT、迷迭香提取物)进行效价测定与比较。

检测方法

样品前处理与提取:根据样品性质,采用水提、有机溶剂提取或酸碱水解等方法,充分释放抗氧化成分。

荧光探针(FL)准备:常用荧光素(FL)作为探针,将其溶解于磷酸盐缓冲液中,避光保存备用。

自由基引发剂(AAPH)制备:使用2,2'-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(AAPH)作为过氧自由基的热分解引发剂。

Trolox标准曲线制作:配制不同浓度的Trolox标准溶液,与样品同条件测定,建立剂量-响应曲线。

反应体系加样:在微孔板或比色皿中依次加入荧光素探针、样品/标准品/空白,预热后快速加入AAPH启动反应。

荧光强度实时监测:立即将反应体系置于荧光计中,在激发波长485nm,发射波长520nm下持续监测荧光衰减。

荧光衰减曲线记录:每隔1-2分钟记录一次荧光强度,持续监测直至荧光完全淬灭或达到设定时间(通常30-90分钟)。

净保护面积(Net AUC)计算:通过积分计算样品荧光衰减曲线与空白曲线下的面积差,得到净保护面积。

ORAC值计算与表示:根据标准曲线,将样品的净保护面积换算为Trolox当量,通常以μmol TE/g或μmol TE/mL表示。

方法验证与质量控制:通过测定精密度、准确度、回收率及使用标准参考物质,确保检测结果的可靠性。

检测仪器设备

荧光微孔板读数仪:核心设备,能够对96孔或384孔板进行温控和实时荧光强度检测,实现高通量分析。

荧光分光光度计:配备温控比色皿架的型号,可用于单个样品或小批量样品的精确测定。

多通道移液器:用于快速、准确地向微孔板中加入反应试剂、标准品和样品,保证加样一致性。

精密分析天平:用于精确称量样品、标准品及化学试剂,精度要求达到万分之一克。

pH计:用于配制和校准反应所需的磷酸盐缓冲液,确保反应体系pH值稳定在7.4。

高速离心机:用于样品前处理过程中对提取液进行离心,以去除不溶性杂质,获得澄清上清液。

超声波细胞破碎仪:用于难破碎的固体样品(如植物组织、胶囊内容物)的均质与有效成分提取。

旋涡混合器:用于快速混匀小体积的液体样品或反应体系,确保均匀性。

恒温水浴锅或干燥块:用于预热反应试剂和样品,使反应在恒定的温度(通常为37°C)下启动和进行。

化学试剂与标准品:包括荧光素钠盐、AAPH、Trolox标准品、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠等,需高纯度。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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