抗氧化能力ORAC测定

发布时间:2026-03-26 12:09:28

检测项目

总抗氧化能力(ORAC值):衡量样品清除过氧自由基(ROO·)的综合能力,是ORAC测定的核心结果,通常以每克或每毫升样品中Trolox(水溶性维生素E类似物)的微摩尔当量表示。

水溶性抗氧化成分:检测样品中溶于水的抗氧化物质,如维生素C、多酚、黄酮类化合物、花青素等的综合抗氧化贡献。

脂溶性抗氧化成分:检测样品中溶于有机溶剂的抗氧化物质,如维生素E(生育酚)、类胡萝卜素、辅酶Q10等的综合抗氧化贡献。

过氧自由基清除率:在特定时间点,样品对过氧自由基的清除效率百分比,反映其抗氧化的即时效果。

抗氧化反应动力学曲线:通过荧光衰减曲线记录整个氧化反应过程,分析样品抗氧化的作用速度和持续时间。

抗氧化保护面积:通过计算荧光衰减曲线下净面积(AUC)来量化抗氧化保护效果,是计算ORAC值的基础。

Trolox当量抗氧化能力:以标准抗氧化剂Trolox为参照,将样品的抗氧化能力换算成等价的Trolox浓度,便于不同样品间的比较。

抗过氧自由基活性:特指样品针对由AAPH(2,2'-偶氮二异丁基脒二盐酸盐)热分解产生的过氧自由基的抑制活性。

荧光探针保护能力:评估样品保护荧光探针(如荧光素)免受自由基攻击而淬灭的能力,直接关联检测信号。

单位质量/体积抗氧化效能:将测得的ORAC值归一化到单位质量(固体)或单位体积(液体),用于评估原料或产品的抗氧化效率。

检测范围

水果与蔬菜及其制品:如浆果(蓝莓、草莓)、柑橘、绿叶蔬菜、果汁、果酱等,评估其天然抗氧化营养素含量。

谷物与豆类:如全麦、燕麦、红豆、黑豆等,检测其含有的多酚、植酸等抗氧化成分。

食用油脂与坚果:如橄榄油、核桃油、杏仁、核桃等,评估其脂溶性抗氧化物质(如维生素E)的稳定性与含量。

茶、咖啡与草本饮料:如绿茶、红茶、咖啡、花草茶等,测定其丰富的多酚类化合物(如儿茶素、绿原酸)的抗氧化能力。

中草药与植物提取物:如银杏叶提取物、葡萄籽提取物、姜黄素等,用于功效成分的筛选与质量控制。

功能性食品与膳食补充剂:如维生素C/E片、葡萄籽胶囊、辅酶Q10胶囊等,验证其宣称的抗氧化功效。

酒类:如红酒、白酒、啤酒等,特别是红酒中的白藜芦醇等多酚物质的抗氧化活性评估。

化妆品与护肤品原料:如植物精油、美白精华、抗衰老乳液等,评价其添加的抗氧化成分对皮肤自由基的清除能力。

生物体液:如血浆、血清、尿液,用于研究人体内总抗氧化状态或特定营养素摄入后的生物利用度。

食品包装材料浸出物:评估从包装材料中迁移至食品中的物质是否具有抗氧化活性或是否影响食品本身的抗氧化性。

检测方法

样品前处理与提取:根据待测物性质,采用水、有机溶剂(如丙酮、乙醇)或混合溶剂进行萃取,以分离水溶性和脂溶性抗氧化成分。

荧光素溶液配制:精确配制荧光素钠盐的磷酸盐缓冲液(pH 7.4),作为自由基攻击的荧光探针,其稳定性对结果至关重要。

自由基引发剂(AAPH)制备:新鲜配制AAPH的缓冲液,其在37°C下能匀速产生过氧自由基,是反应的氧化压力来源。

Trolox标准曲线制作:使用不同浓度的Trolox标准溶液进行测定,绘制荧光衰减曲线下净面积与浓度的标准曲线。

反应体系构建:在微孔板或比色皿中依次加入荧光素探针、待测样品(或标准品/空白)和AAPH引发剂,启动氧化反应。

荧光强度实时监测:将反应体系置于荧光检测仪中,在激发波长485nm、发射波长520nm下,每1-2分钟读取一次荧光值,持续1-2小时。

荧光衰减曲线绘制:以反应时间为横坐标,荧光强度为纵坐标,绘制空白、标准品和样品的荧光强度随时间变化的曲线。

曲线下净面积(Net AUC)计算:通过积分计算样品曲线与空白曲线之间的面积差,即样品提供的抗氧化保护面积。

ORAC值计算:根据样品的Net AUC和Trolox标准曲线,计算出样品相当于多少微摩尔Trolox的抗氧化能力,并归一化。

数据验证与重复:每个样品至少进行三次平行实验,计算相对标准偏差(RSD),确保数据的准确性与重现性。

检测仪器设备

荧光微孔板读数仪:核心设备,具备温控功能(通常为37°C),能自动、高通量地实时监测96或384孔板中每个孔的荧光强度变化。

精密电子天平:用于精确称量样品、标准品和化学试剂,精度通常要求达到万分之一克。

pH计:用于校准和确认配制缓冲液及反应体系的酸碱度,确保其在生理相关pH(7.4)条件下进行。

高速离心机:用于样品前处理中分离不溶性杂质,获取澄清的上清液用于检测。

超声波细胞破碎仪/水浴超声仪:用于辅助提取样品中的抗氧化物质,提高萃取效率。

涡旋混合器:用于快速混匀微量液体反应体系,确保反应物均匀分布。

微量移液器及枪头:用于精确移取微升级别的样品、试剂和标准液,是保证实验精度的关键工具。

恒温水浴锅或干燥箱:用于预热试剂或保持反应温度恒定,确保AAPH分解产生自由基的速率稳定。

化学试剂纯水系统:提供高纯度的去离子水或超纯水,用于配制所有溶液,避免杂质干扰。

数据分析软件:仪器配套或专业的统计软件,用于处理荧光数据、计算曲线下面积、拟合标准曲线并最终得出ORAC值。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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