
目标多肽纯度:指目标多肽序列在样品中所占的百分比,是衡量合成成功与否的核心指标。
缺失肽杂质:指在合成过程中因偶联不完全而产生的比目标序列少一个或多个氨基酸的短肽片段。
截断肽杂质:通常指在合成或纯化过程中因裂解不完全而产生的仍连接部分树脂或保护基的肽链。
删除肽杂质:指在合成过程中错误地插入了非目标氨基酸的肽序列。
氧化产物:主要指多肽中甲硫氨酸、半胱氨酸等氨基酸残基被氧化后形成的杂质。
二硫键错配:对于含多个半胱氨酸的多肽,二硫键连接方式不正确所形成的异构体。
消旋化杂质:在合成过程中,氨基酸手性中心发生外消旋化,生成非天然D型氨基酸的杂质。
乙酰化/甲酰化杂质:多肽N端或特定氨基酸侧链发生非预期乙酰化或甲酰化修饰。
多聚体:多个多肽分子通过非共价或二硫键聚集形成的高分子量复合物。
溶剂与盐残留:检测合成与纯化过程中使用的有机溶剂、切割试剂及无机盐的残留量。
化学合成线性多肽:适用于通过固相或液相化学法合成的无修饰线性多肽序列。
修饰多肽:涵盖磷酸化、糖基化、甲基化、生物素标记等各种翻译后修饰或人工修饰的多肽。
环状多肽:包括通过二硫键、酰胺键或其它化学键形成的首尾相连的环状多肽分子。
长链多肽:通常指长度超过30个氨基酸残基的合成多肽,其杂质谱更为复杂。
短肽与片段:长度小于15个氨基酸的短链多肽及其片段,常用于抗原表位研究。
含有非天然氨基酸的多肽:序列中引入了非标准氨基酸的多肽,需特别关注其结构与纯度。
荧光标记多肽:连接了FITC、TAMRA等荧光基团的多肽,需同时分析标记效率与纯度。
同位素标记多肽:用于定量质谱分析的重氮或碳13标记的多肽内标。
多肽药物原料药:作为药物活性成分的多肽,其纯度要求极高,需符合药典标准。
多肽文库组分:组合化学合成的多肽混合物中单个组分的纯度评估。
反相高效液相色谱法:最常用的纯度分析方法,基于多肽疏水性的差异在C18等色谱柱上进行分离。
高效液相色谱-质谱联用法:结合HPLC的分离能力与MS的鉴定能力,用于确认主峰身份并鉴定杂质结构。
离子交换色谱法:基于多肽所带电荷的差异进行分离,特别适用于带电荷修饰或多聚体的分析。
尺寸排阻色谱法
毛细管电泳法:基于多肽在电场下的迁移率差异进行高分辨率分离,尤其适用于电荷变异体的分析。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱:用于精确测定多肽的分子量,快速判断缺失肽、截断肽等杂质。
电喷雾电离质谱:可产生多电荷离子,能精确分析高分子量的多肽及其聚集体。
紫外-可见分光光度法:用于定量测定多肽溶液的浓度,是计算纯度的基础。
氨基酸组成分析:通过酸水解后测定氨基酸比例,间接验证序列与纯度。
肽图分析
高效液相色谱仪:配备紫外或二极管阵列检测器,是进行RP-HPLC纯度分析的核心设备。
液相色谱-质谱联用仪:将LC系统与质谱仪在线连接,实现分离与鉴定一体化,是杂质鉴定的黄金标准。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪:用于快速分子量测定和纯度筛查的桌面型质谱设备。
电喷雾电离四极杆或轨道阱质谱仪
毛细管电泳仪
紫外-可见分光光度计
氨基酸分析仪
制备型液相色谱仪
分析天平
pH计与电导率仪
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