
总糖含量测定:通过化学或酶法水解样品中的糖链,采用比色法或色谱法测定释放出的单糖总量,反映整体糖基化水平。
N-糖链图谱分析:使用肽N-糖苷酶F释放连接在天冬酰胺上的糖链,通过亲水相互作用色谱分离并鉴定不同结构的N-糖链组成与相对丰度。
O-糖链图谱分析:采用β-消除化学反应或特异性内切糖苷酶释放连接在丝氨酸或苏氨酸上的糖链,结合质谱技术解析其核心结构类型与微观不均一性。
糖基化位点鉴定:利用串联质谱技术在蛋白质酶解后分析肽段质量偏移,精确识别发生糖基化修饰的特定氨基酸残基位置。
单糖组成分析:通过酸水解将复杂糖链彻底分解为葡萄糖、半乳糖等单糖组分,使用高效阴离子交换色谱与脉冲安培检测器进行定性与定量。
唾液酸含量测定:针对末端唾液酸残基,采用特异性酸水解或神经氨酸苷酶处理,结合荧光标记或色谱法量化其含量与N-乙酰神经氨酸/N-羟乙酰神经氨酸比例。
岩藻糖基化水平分析:使用凝集素印迹或特异性抗体检测核心岩藻糖与末端岩藻糖修饰程度,评估与免疫功能相关的糖基化特征。
甘露糖苷酶敏感性测试:通过内切β-N-乙酰葡糖胺酶H消化判断高甘露糖型与杂合型N-糖链的存在与否,用于评估蛋白质折叠状态与质量控制。
聚乳胺酸序列检测:利用特异性内切酶与质谱联用技术识别线性聚-N-乙酰乳胺酸重复单元,分析其在神经细胞黏附分子等蛋白上的延伸长度。
糖肽定量分析