功能性肽段质谱检测

  发布时间:2025-08-07 11:32:14

检测项目

肽段序列确认:通过质谱碎片离子信息解析肽段的氨基酸序列,确保序列准确性,具体参数包括序列覆盖度≥95%,碎片离子匹配率≥90%,误判率≤1%。

肽段分子量测定:采用高分辨质谱技术测定肽段的精确分子量,验证肽段完整性,具体参数包括质量范围500~50000Da,质量精度≤5ppm,重复性RSD≤2%。

肽段绝对含量定量:通过稳定同位素标记(如SILAC、iTRAQ)或外标法,测定肽段的绝对含量,具体参数包括检测限≤1pg/mL,线性范围≥5个数量级,定量重复性RSD≤5%。

肽段相对含量分析:比较不同样品中肽段的相对含量变化,用于差异表达研究,具体参数包括比值变异系数≤10%,差异倍数≥1.5倍(P<0.05),样品平行性≥3次。

翻译后修饰鉴定:检测肽段的磷酸化、糖基化、乙酰化等修饰类型及位点,具体参数包括修饰位点定位准确率≥98%,修饰肽段检测率≥80%,修饰类型覆盖≥10种。

肽段纯度分析:测定肽段样品中的杂肽、降解产物等杂质含量,评估纯度,具体参数包括纯度≥95%(面积归一化法),杂质峰面积占比≤5%,主成分峰保留时间RSD≤1%。

肽段异构体分离与鉴定:分离并鉴定肽段的构象异构体、序列异构体或修饰异构体,具体参数包括异构体分离度≥1.5,淌度分辨率≥100,鉴定准确率≥95%。

肽段稳定性检测:分析肽段在储存、加工过程中的降解产物(如断裂肽、脱酰胺肽),评估稳定性,具体参数包括降解产物检测限≤0.1%,降解速率常数测定误差≤10%,加速稳定性试验周期≥6个月。

肽段与靶蛋白相互作用分析:通过免疫共沉淀-质谱(CoIP-MS)或交联质谱(XL-MS),鉴定肽段与靶蛋白的相互作用位点,具体参数包括相互作用肽段覆盖率≥70%,位点定位准确率≥90%,结合亲和力测定范围1nM~10μM。

未知肽段从头测序:对未数据库收录的肽段进行序列解析,具体参数包括序列长度≥5个氨基酸,碎片离子匹配率≥85%,序列准确性≥90%。

肽段末端氨基酸分析:测定肽段的N-末端和C-末端氨基酸类型,具体参数包括末端氨基酸鉴定准确率≥95%,检测限≤10fmol,样品用量≤1μg。

检测范围

食品功能性肽:包括大豆肽、胶原蛋白肽、海洋鱼皮肽、小麦谷蛋白肽等食品添加肽,检测其序列、含量及修饰情况,保障食品肽产品质量与安全性。

医药用功能性肽:包括胰岛素类似物、抗病毒肽、抗肿瘤肽、生长激素释放肽等药用肽,检测其分子量、纯度及翻译后修饰,确保药用肽有效性与一致性。

化妆品功能性肽:包括抗皱肽(如乙酰基六肽-8)、美白肽(如谷胱甘肽)、修复肽(如棕榈酰五肽-4)等化妆品添加肽,检测其含量及稳定性,符合化妆品原料规范。

饲料添加剂肽:包括抗菌肽(如溶菌酶肽)、生长促进肽(如促生长激素释放肽)、免疫调节肽等饲料用肽,检测其活性成分含量及杂质,保障饲料肽功效。

生物农药功能性肽:包括杀虫肽(如Bt毒素肽)、抗病肽(如防御素)等生物农药用肽,检测其毒性肽含量及降解特性,符合生物农药登记要求。

保健品功能性肽:包括免疫调节肽(如乳铁蛋白肽)、抗氧化肽(如谷胱甘肽)、改善睡眠肽(如γ-氨基丁酸肽)等保健品肽,检测其功能成分含量及安全性。

酶法生产肽段产品:包括蛋白酶(如胰蛋白酶、胃蛋白酶)水解产生的肽段产品,检测其水解度(DH)及肽段分布,具体参数包括DH≥20%,肽段分子量分布100~5000Da占比≥80%。

发酵法生产肽段产品:包括微生物(如芽孢杆菌、酵母菌)发酵产生的肽段产品,检测其发酵副产物(如内毒素)及肽段纯度,具体参数包括内毒素含量≤0.5EU/mg,纯度≥90%。

重组蛋白表达肽段:包括基因工程菌(如大肠杆菌、酵母菌)表达的重组肽段(如胰岛素原肽),检测其表达量及正确性,具体参数包括表达量≥1g/L,序列正确率≥99%。

天然来源肽段:包括海洋生物(如海参、海藻)、植物(如人参、枸杞)、动物(如牛骨、羊胎盘)等天然原料提取的肽段,检测其活性成分及重金属残留,具体参数包括活性肽含量≥50%,重金属(如铅、汞)含量≤1ppm。

功能性肽原料:包括肽段粗提物、精制肽粉、肽溶液等原料,检测其理化指标(如水分、灰分)及生物活性,具体参数包括水分≤5%,灰分≤3%,抗氧化活性(DPPH清除率)≥50%。

检测标准

ISO20418-1:2018食品中肽段的测定第1部分:液相色谱-质谱联用法

GB/T38471-2020化妆品中功能性肽的测定液相色谱-串联质谱法

ASTME3298-21生物制药中肽段纯度分析的标准试验方法

ISO16348:2014生物技术重组DNA衍生肽段的分析方法

GB/T22492-2008大豆肽粉

GB/T31645-2016胶原蛋白肽

ASTMD7943-14利用液相色谱-质谱法测定生物燃料中肽段含量的标准试验方法

ISO23718:2021饲料中功能性肽的测定液相色谱-串联质谱法

GB/T39695-2020抗菌肽含量测定液相色谱-质谱联用法

ISO18363-1:2015化妆品分析方法第1部分:用液相色谱-串联质谱法测定肽类物质

GB/T40894-2021功能性肽产品通则

ISO22662:2020生物技术肽段的定性与定量分析质谱法

GB/T39991-2021海洋鱼皮胶原蛋白肽

ASTME2923-16用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法测定肽段分子量的标准试验方法

ISO13885-1:2017食品肽段的测定第1部分:总则

检测仪器

液相色谱-串联质谱仪(LC-MS/MS):结合液相色谱分离与串联质谱结构分析,用于肽段定性与定量,具备Orbitrap高分辨率质量分析器,分辨率≥140000FWHM,扫描速度≥12Hz,多反应监测(MRM)模式检测限≤1pg/mL。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOFMS):通过基质辅助激光解吸电离使肽段离子化,飞行时间质谱测定分子量,用于快速筛查,质量范围500~50000Da,质量精度≤5ppm,样品通量≥100个/小时。

纳升液相色谱系统(nano-LC):采用纳升流速(50~500nL/min)和细内径色谱柱(75~150μm),提高分离效率与灵敏度,用于微量肽段分离,柱效≥100000plates/m,重现性RSD≤3%,柱寿命≥500次进样。

高分辨质谱仪(HR-MS):具备高质量分辨率与准确性,用于翻译后修饰鉴定,质量分辨率≥240000FWHM,动态范围≥10^5,修饰位点定位准确率≥98%,修饰肽段检测率≥80%。

液相色谱-三重四极杆质谱仪(LC-QQQ):采用三重四极杆质量分析器,MRM模式用于定量,检测限≤1pg/mL,线性范围≥5个数量级,定量重复性RSD≤5%,样品throughput≥60个/小时。

离子淌度质谱仪(IM-MS):结合离子淌度分离与质谱分析,用于异构体分离,淌度分辨率≥100,分离时间≤100ms,异构体分离度≥1.5,鉴定准确率≥95%。

串联质谱仪(MS/MS):一级质谱选择目标离子,二级质谱碰撞解离分析碎片,用于序列解析与修饰鉴定,碰撞能量范围10~100eV,碎片离子检测率≥95%,序列覆盖度≥90%。

纳升电喷雾离子源(nano-ESI):用于LC-MS/MS联用,产生纳升量级喷雾,提高离子化效率,适用于微量肽段样品,离子化效率≥80%,喷雾稳定性RSD≤2%,样品消耗≤1μL。

液相色谱-二极管阵列检测器(LC-DAD):用于肽段纯度分析,检测波长范围190~400nm,波长精度≤1nm,峰面积重复性RSD≤1%,纯度分析准确率≥95%。

高速离心机:用于肽段样品预处理(如蛋白沉淀、离心分离),转速≥15000rpm,离心力≥20000g,温度控制范围4~25℃,样品容量≥100mL。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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