饲料黄曲霉毒素B1酶联法检测

  发布时间:2025-07-15 10:38:52

检测项目

样本前处理:制备饲料样本用于后续提取。具体检测参数:研磨细度80目,样本重量5g,均质时间2min。

溶剂提取:使用混合溶剂提取毒素。具体检测参数:甲醇-水(70:30)体积比,振荡时间30min,温度25°C。

离心分离:分离提取液中的固体残渣。具体检测参数:离心速度4000rpm,时间10min,离心力2000g。

稀释处理:调整提取液浓度。具体检测参数:磷酸盐缓冲液稀释比例1:10,pH值7.4。

微孔板包被:固定抗体于反应孔。具体检测参数:抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体浓度1μg/mL,包被时间2h。

封闭处理:阻断非特异性结合。具体检测参数:脱脂牛奶溶液浓度5%,封闭时间1h。

样本加样:加入待测样本和标准品。具体检测参数:加样体积100μL,加样精度±2μL。

抗原抗体孵育:促进结合反应。具体检测参数:孵育温度37°C,时间1h,湿度控制60%。

洗涤步骤:去除未结合物质。具体检测参数:PBST缓冲液洗涤次数3次,每次浸泡1min。

酶标抗体添加:引入标记二抗。具体检测参数:辣根过氧化物酶标记抗体稀释比例1:1000,添加体积100μL。

二次孵育:完成酶标记反应。具体检测参数:温度37°C,时间30min。

底物添加:启动显色反应。具体检测参数:TMB底物浓度0.1mg/mL,添加体积100μL。

显色反应:催化颜色变化。具体检测参数:室温避光时间15min,反应终止条件OD值变化。

反应终止:停止酶催化。具体检测参数:2M硫酸终止液体积50μL。

吸光度读取:测量颜色强度。具体检测参数:检测波长450nm,参考波长630nm,读数范围0-4.0OD。

结果计算:定量毒素浓度。具体检测参数:标准曲线拟合R²≥0.99,检测限0.1μg/kg。

检测范围

玉米饲料:玉米为主要原料的家禽和牲畜饲料。

大豆粕:大豆油提取后的高蛋白饲料副产品。

小麦麸皮:小麦加工副产物用于反刍动物饲料。

鱼粉:鱼类加工残渣制成的水产饲料原料。

花生粕:花生油提取后的饲料添加剂。

棉籽粕:棉花籽加工副产物用于混合饲料。

配合饲料:多种原料配制的成品牲畜饲料。

预混料:添加维生素和矿物质的浓缩饲料。

青贮饲料:发酵保存的牧草类饲料。

宠物饲料:猫狗等伴侣动物食品。

水产饲料:鱼虾养殖专用颗粒饲料。

反刍动物饲料:牛羊等草食动物营养饲料。

检测标准

ISO 16050:2003动物饲料中黄曲霉毒素B1含量的测定。

GB/T 17480-2008饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法。

GB 5009.22-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定。

CAC/RCP 45-1997谷物中霉菌毒素污染预防规范。

AOAC Official Method 999.07玉米和花生酱中黄曲霉毒素测定。

EN 14123:2003食品和饲料中黄曲霉毒素B1测定高效液相色谱法。

GB/T 30957-2014饲料中霉菌毒素的测定免疫亲和柱净化法。

检测仪器

酶标仪:测量微孔板吸光度。在本检测中的具体功能:读取显色反应后的OD值,用于定量毒素浓度。

离心机:分离液体和固体组分。在本检测中的具体功能:离心样本提取液,确保上清液澄清。

振荡器:混合样本和溶剂。在本检测中的具体功能:促进毒素提取效率,参数包括振荡频率200rpm。

移液器:精确转移液体。在本检测中的具体功能:添加试剂和样本,体积精度±1μL。

恒温孵育箱:控制反应温度。在本检测中的具体功能:维持孵育温度37°C±0.5°C。

微孔板洗涤器:自动化洗涤步骤。在本检测中的具体功能:去除未结合物质,提高洗涤一致性。

天平:称量样本重量。在本检测中的具体功能:精确称重饲料样本,精度0.001g。

pH计:测量缓冲液酸碱度。在本检测中的具体功能:确保试剂pH值准确,范围6.0-8.0。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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