真菌提取rna检测

  发布时间:2025-07-01 18:18:45

检测项目

RNA浓度定量:紫外分光光度法测定,要求A260读数在0.1-1.0线性范围,检测精度±5ng/μl

纯度分析:A260/A280比值检测,合格范围1.8-2.1;A260/A230比值>2.0

完整性检测:Agilent 2100 Bioanalyzer分析RIN值(RNA完整值),要求RIN≥7.0

DNA残留量:qPCR检测基因组DNA残留,阈值≤0.01%总核酸量

片段分布:凝胶电泳检测28S/18S rRNA条带比值≥1.5

酶抑制物检测:RT-qPCR扩增效率验证,要求效率值90%-110%

内毒素含量:鲎试剂法测定,限值≤0.1EU/μg RNA

蛋白质残留:BCA法检测,标准≤0.1μg/μg RNA

有机溶剂残留:GC-MS法测定苯酚≤0.1%、氯仿≤0.01%

微生物负载:无菌试验培养72小时无微生物生长

冻融稳定性:-80℃三次冻融后RIN值变化≤0.5

反转录效率:cDNA合成率不低于95%

检测范围

丝状真菌菌丝体:包括曲霉属、青霉属等工业发酵菌株

酵母细胞:酿酒酵母、毕赤酵母等单细胞真菌样本

食用蕈类:香菇、金针菇等大型真菌子实体组织

药用真菌:灵芝、冬虫夏草等药用部位样本

植物病原真菌:稻瘟病菌、小麦赤霉病菌侵染组织

环境样本:空气真菌过滤器、土壤浸出液沉淀物

发酵产物:真菌发酵液菌体沉淀及代谢产物复合物

真菌孢子悬液:分生孢子/担孢子浓度≥106个/ml

临床分离株:深部真菌感染患者痰液/组织活检样本

食品基质:谷物、果蔬表面真菌污染生物膜

木质降解真菌:腐朽木材中白腐菌/褐腐菌菌丝混合物

极端环境真菌:地衣共生体及极地真菌分离物

检测标准

ISO 21571:2005 食品中核酸提取方法通则

GB/T 34796-2017 核酸浓度与纯度测定(紫外分光光度法)

ISO 20391-1:2018 细胞计数分析规范

GB/T 37871-2019 RNA完整性检测方法

ASTM E2140-01 分子生物学试剂纯度标准

EP 2.6.31 欧洲药典核酸制品检测指南

GB 4789.43-2016 食品微生物分子检测通则

ISO 22174 食品病原体PCR检测通用要求

YY/T 1256-2015 体外诊断试剂盒RNA提取标准

USP<1079.1> 药品生产中核酸质量控制

ISO 20166-2 福尔马林固定石蜡包埋组织RNA检测

GB/T 35823-2018 林业微生物RNA提取规范

检测仪器

NanoDrop One紫外分光光度计:检测波长190-840nm,仅需1μl样品完成浓度纯度分析

Agilent 4200 TapeStation系统:自动化电泳平台,检测范围25-4000nt,精度±5bp

Covaris LE220超声破碎仪:聚焦超声技术,实现真菌细胞壁高效裂解

Qubit 4.0荧光计:RNA HS检测试剂盒,灵敏度达0.5pg/μl

Thermo KingFisher Flex核酸提取仪:磁珠法全自动提取,通量96样本/小时

Bio-Rad CFX96 qPCR仪:进行DNA残留验证,温度均一性±0.2℃

Eppendorf 5430离心机:最大RCF 30,130×g,专用于微量RNA沉淀

Miltenyi gentleMACS组织破碎仪:程序化处理坚韧真菌组织

Labconco真空离心浓缩仪:加速有机溶剂挥发,保护RNA完整性

Forma -86℃超低温冰箱:配备温度监控确保RNA长期储存稳定

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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