原位杂交免疫荧光显微镜联检

发布时间:2026-07-18 13:57:43

检测项目

mRNA与蛋白共定位分析:同时检测细胞内特定信使RNA及其编码蛋白质的表达位置与丰度,验证基因表达关系。

病毒核酸与抗原检测:在感染组织中同步鉴定病毒基因组/转录本和病毒蛋白,明确病毒感染状态与复制位点。

基因融合事件验证:通过融合基因特异的DNA/RNA探针与断裂蛋白抗体共检测,直观确认染色体易位或基因重排。

肿瘤标志物联合筛查:在肿瘤组织切片中同时探查致癌基因的扩增/过表达和相应癌蛋白,用于分子分型。

非编码RNA与蛋白互作研究:分析长链非编码RNA或microRNA与调控靶蛋白在亚细胞结构中的空间邻近性。

细胞周期相关分子监测:结合细胞周期特异性mRNA标记与蛋白标记(如Ki-67),评估细胞增殖活性。

神经递质与受体共表达:在神经组织中同步定位神经肽mRNA和其受体蛋白,解析神经环路。

病原体潜伏感染鉴定:检测潜伏期病原体(如疱疹病毒)的潜伏相关转录本和裂解期蛋白,区分感染阶段。

表观遗传修饰关联分析:探查特定基因组位点(如着丝粒)的重复序列与组蛋白修饰标记(如H3K9me3)的共分布。

干细胞多能性标志物鉴定:在干细胞或早期胚胎中同时检测多能性因子(如OCT4)的mRNA和蛋白表达。

检测范围

福尔马林固定石蜡包埋组织:适用于临床存档的FFPE样本,是回顾性研究和病理诊断的主要材料来源。

冰冻组织切片:用于保存更好的核酸和抗原完整性,尤其适用于RNA易降解的检测目标。

培养细胞爬片或涂片:适用于贴壁或悬浮细胞系,便于进行细胞生物学机制研究和高通量筛选。

染色体铺片:用于在染色体水平进行基因定位、拷贝数变异及融合基因的可视化分析。

整体胚胎或组织器官:在小鼠、斑马鱼等模式生物胚胎中,进行发育生物学相关的三维空间表达谱分析。

循环肿瘤细胞:在外周血CTC中同时检测肿瘤特异性基因异常和上皮性蛋白标志物,用于液体活检。

穿刺活检小样本:最大化利用有限的临床穿刺样本(如细针穿刺),获取多维分子信息。

植物组织切片:应用于植物学研究,分析植物病原、基因表达及信号分子在组织中的分布。

微生物群落样本:对环境或宿主内微生物群落进行种属特异性核酸和功能蛋白的原位鉴定。

细胞器特异性定位研究:在亚细胞水平,如线粒体、内质网或核仁内,研究核酸与蛋白的共定位。

检测方法

样本前处理与抗原修复:通过蛋白酶K消化和热诱导的表位修复法,平衡核酸可及性与抗原性恢复。

探针设计与标记:设计针对目标DNA或RNA序列的特异性探针,并用荧光素(如FITC、Cy3)直接标记。

原位杂交反应:将标记探针与样本中的靶核酸在严格控制的温度下进行杂交,随后进行严谨性洗涤。

免疫荧光染色:在ISH完成后,使用针对目标蛋白的一抗及荧光素标记的二抗进行孵育染色。

顺序检测优化:通常先进行ISH再进行IF,以避免蛋白酶处理破坏蛋白表位,并需优化步骤间封闭条件。

多重荧光信号放大应用酪酰胺信号放大技术增强弱表达靶点的荧光信号,提高检测灵敏度。

细胞核复染与封片使用DAPI或Hoechst等染料对细胞核进行复染,并使用抗淬灭封片剂封片以保存荧光。

对照实验设置

信号淬灭与顺序剥离

<强数据采集与分析方案

检测仪器设备

<强正置荧光显微镜

<强激光扫描共聚焦显微镜

<强全玻片扫描成像系统

<强高灵敏度科学级CCD相机

<强杂交仪/原位PCR仪

<强暗室或防光罩

<强精密移液器与加样系统

<强湿盒与温控孵育箱

<强图像分析工作站与软件

<强超纯水制备系统与pH计

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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