离心试验仪RNA完整性检测

发布时间:2026-07-17 10:22:16

检测项目

总RNA浓度测定:通过分光光度法或荧光法,精确测量样本中总RNA的含量,是评估提取效率的基础指标。

RNA纯度评估(A260/A280比值):检测RNA样本中蛋白质污染的程度,理想比值在1.8-2.1之间,表明纯度较高。

RNA纯度评估(A260/A230比值):评估RNA样本中盐类、胍盐或酚等有机溶剂的污染情况,理想比值应大于2.0。

28S/18S rRNA比值分析:通过电泳图谱计算真核生物RNA中28S与18S核糖体RNA条带的强度比,是评估完整性的经典指标,理想值约为2:1。

RNA完整性数值(RIN)测定:使用自动化电泳系统(如安捷伦生物分析仪)对RNA完整性进行数字化评分,分值范围1-10,分值越高完整性越好。

RNA片段化程度检测:观察电泳图谱中是否存在低于18S rRNA的弥散拖尾,以判断RNA是否发生降解。

基因组DNA残留检测:通过琼脂糖凝胶电泳或特异性qPCR,确认RNA样本中是否含有基因组DNA污染。

mRNA完整性检查:针对多聚腺苷酸尾的mRNA,通过特异性引物进行RT-PCR扩增,评估其可用于下游实验的完整性。

小分子非编码RNA富集度检测:针对miRNA等小RNA研究,检测总RNA样本中小RNA的富集程度和完整性。

RNA样品稳定性监测:在不同储存条件或时间点下,重复检测上述指标,以评估RNA样品的长期稳定性。

检测范围

动物组织来源RNA:适用于从心、肝、脾、肺、肾、脑等多种动物组织中提取的RNA完整性检测。

植物组织来源RNA:适用于富含多糖多酚的复杂植物组织(如叶片、根、种子)中提取的RNA质量评估。

培养细胞系RNA:适用于贴壁或悬浮培养的哺乳动物、昆虫、微生物细胞系所提取的RNA。

血液及体液来源RNA:适用于从全血、血浆、血清、脑脊液等体液中分离的循环RNA或细胞RNA。

FFPE样本中提取的RNA:适用于从福尔马林固定石蜡包埋的病理组织样本中提取的、通常已部分降解的RNA的质量评估。

微生物总RNA:适用于细菌、真菌、病毒等微生物样本的总RNA完整性分析。

外泌体及细胞外囊泡RNA:适用于从生物体液中分离的外泌体等囊泡内所含微量RNA的质量控制。

单细胞转录组测序建库前的RNA:在单细胞测序实验中,对单个细胞或少量细胞裂解释放的RNA进行完整性初筛。

体外转录产物:适用于通过体外转录反应合成的长链或短链RNA产物的纯度和完整性验证。

病毒基因组RNA:适用于从病毒颗粒中纯化的基因组RNA(如SARS-CoV-2 RNA)的完整性检测,对诊断试剂开发至关重要。

检测方法

琼脂糖凝胶电泳法:传统方法,通过电泳分离并用溴化乙锭染色,直观观察28S、18S和5S rRNA条带判断完整性。

毛细管电泳法(如安捷伦生物分析仪):自动化微流控芯片技术,提供高灵敏度的电泳图谱并自动计算RIN值,所需样品量极少。

:使用特异性结合RNA的荧光染料,比传统紫外分光光度法更准确测定浓度,且不受常见污染物干扰。

:通过扩增不同长度片段的管家基因(如GAPDH的3‘端和5’端),比较Ct值差异来间接评估mRNA完整性。

:基于绝对定量的数字PCR平台,精确定量完整靶标转录本与降解片段的拷贝数,灵敏度极高。

:使用甲醛或乙二醛等变性剂防止RNA形成二级结构,使迁移率与分子量严格成正比,结果更准确。

:将样品点在尼龙膜或芯片上,用特异性探针杂交,可同时检测多个目标转录本的完整性。

<强]核糖体分析图谱法

<强]实验室信息管理系统自动评分法

检测仪器设备

<强]高速冷冻离心机

<强]微量分光光度计/纳米滴度计

<强]荧光计(如 Qubit)

<强]全自动核酸蛋白分析系统(如安捷伦生物分析仪)

<强]琼脂糖凝胶电泳系统

<强]化学发光成像仪/凝胶成像系统

<强]实时荧光定量 PCR 仪

<强]微滴数字 PCR 仪

<强]新一代测序仪

<强]-80°C 超低温冰箱及液氮罐

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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