生物样本代谢物LC-MS定量

发布时间:2026-07-14 10:51:04

检测项目

氨基酸及其衍生物:定量分析血液、尿液等样本中20余种常见氨基酸及其代谢产物,反映蛋白质代谢与营养状况。

脂肪酸与酰基肉碱:检测短链、中链及长链脂肪酸及其结合的肉碱形式,用于评估能量代谢与脂肪酸氧化障碍。

有机酸:定量尿液或血浆中的多种有机酸,如柠檬酸、琥珀酸等,是诊断有机酸血症和线粒体功能的关键指标。

胆汁酸谱:全面分析初级与次级胆汁酸,用于研究肝胆疾病、肠道菌群代谢及脂质消化吸收功能。

糖类与糖代谢中间产物:包括葡萄糖、乳酸、丙酮酸及糖酵解和三羧酸循环中间体,揭示细胞能量代谢状态。

核苷酸及其代谢物:定量细胞内嘌呤和嘧啶核苷酸及其降解产物,与细胞增殖、能量转换和遗传信息传递密切相关。

维生素与辅酶:检测水溶性和脂溶性维生素及其活性形式,评估机体微量营养素水平及辅酶代谢状态。

神经递质与相关物质:定量多巴胺、5-羟色胺、谷氨酸等神经活性物质,用于神经精神疾病及脑代谢研究。

激素及其代谢产物:包括类固醇激素、甲状腺激素等,在内分泌功能评估和疾病诊断中具有重要价值。

药物及其代谢物:对生物样本中的原型药物及其I相、II相代谢产物进行定量,支持药代动力学与治疗药物监测研究。

检测范围

浓度范围覆盖广:可定量从pmol/L到mmol/L浓度水平的代谢物,跨越多个数量级,满足痕量与高丰度物质同时检测需求。

样本类型多样:适用于血清、血浆、尿液、脑脊液、组织匀浆液、细胞培养上清液等多种生物样本基质。

极性范围宽:通过不同的色谱分离模式,能够覆盖从强极性(如氨基酸)到非极性(如胆固醇酯)的各类代谢物。

分子量范围宽:通常可检测分子量在50-1500 Da范围内的中小分子代谢物,涵盖绝大多数内源性代谢产物。

动态范围宽:借助质谱的高动态范围特性,可在单次进样中对浓度差异极大的多种代谢物实现准确定量。

种属适用性广:方法学经过优化和验证后,可应用于人类、啮齿类动物(大鼠、小鼠)、以及其他模式生物的样本分析。

疾病研究领域广:覆盖肿瘤代谢、心血管疾病、神经退行性疾病、糖尿病、先天性代谢缺陷等多种疾病模型的研究。

时间维度监测:能够对同一研究对象在不同时间点(如给药前后、疾病进程)的样本进行纵向动态监测。

空间分辨能力:结合显微采样或成像技术,可拓展至组织切片等空间分辨的代谢物分布研究。

通量灵活可变:可根据需求开发高通量(每日数百样本)或低通量精细分析的方案,平衡速度与数据质量。

检测方法

样本前处理与提取:采用蛋白沉淀(如甲醇/乙腈)、液液萃取或固相萃取等方法,去除蛋白和磷脂,富集目标代谢物。

同位素内标法:在样本处理前加入稳定同位素标记的(如13C, 15N)内标物质,以校正提取效率、离子化抑制和仪器波动。

液相色谱分离:主要采用反相色谱分离中等至非极性物质,亲水相互作用色谱分离强极性和离子型化合物。

梯度洗脱程序:优化流动相(水/甲醇/乙腈含挥发性添加剂)的梯度变化,实现复杂样本中数百种代谢物的基线分离。

电喷雾离子化:最常用的离子源,可根据目标物性质选择正离子模式或负离子模式进行电离,获得[M+H]+或[M-H]-离子。

多反应监测扫描:在串联四极杆质谱上使用MRM模式,通过母离子-子离子对进行特异性检测,极大提高选择性与灵敏度。

标准曲线定量:使用系列浓度的标准品溶液建立标准曲线(通常为线性或加权线性回归),用于计算未知样本中的绝对浓度。

质量控制样品:在每批实验中插入空白样本、零浓度样本、低中高浓度质控样,以监控整个分析流程的稳定性和准确性。

数据采集与处理:使用仪器配套软件采集原始数据,并利用专业软件进行峰提取、积分、内标校正和浓度计算。

方法学验证:新建立的方法需进行特异性、线性、精密度、准确度、回收率、基质效应和稳定性等系统验证以确保可靠性。

检测仪器设备

超高效液相色谱仪:核心分离设备,采用小粒径色谱柱(如1.7-1.8 μm)和高耐压泵系统,实现快速、高分辨的色谱分离。

三重四极杆质谱仪:定量分析的金标准仪器,具备出色的灵敏度、选择性和重复性,尤其适合MRM模式的靶向定量分析。

高分辨质谱仪:如Q-TOF或Orbitrap系列,用于非靶向筛查或需要精确质量数确认的定量研究,提供高分辨率全扫描数据。

自动进样器:带温控功能的高精度自动进样器,确保大批量样本连续进样的准确性和重现性,减少人为误差。

色谱柱恒温箱:精确控制色谱柱温度,提高保留时间的重复性,并对某些分离困难的化合物改善峰形与分离度。

真空离心浓缩仪:用于前处理过程中样本提取液的干燥和浓缩,以复溶至适合上机的溶剂体系中。

氮吹仪:利用高纯氮气快速吹干液体样本,常用于衍生化反应前后或样本浓缩步骤。

精密天平与pH计:用于准确称量标准品和试剂配制,以及调节缓冲溶液的pH值,保证方法的重现性。

超纯水系统:提供电阻率达18.2 MΩ·cm的超纯水,用于流动相、标准品及试剂的配制,避免背景干扰。

数据工作站与处理软件:配备高性能计算机和专业数据处理软件(如MassLynx, Analyst, TraceFinder等),用于仪器控制、方法编辑、数据采集和定量分析。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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