ASFV B646L基因（p72蛋白基因）检测：针对病毒衣壳主要结构蛋白p72的编码基因进行检测，是ASFV种特异性鉴定的核心靶标。
ASFV CP204L基因（p30蛋白基因）检测：针对病毒早期表达的高度免疫原性p30蛋白编码基因，常用于早期感染诊断。
ASFV E183L基因（p54蛋白基因）检测：针对与病毒入侵细胞相关的p54蛋白编码基因，是重要的辅助诊断靶标。
ASFV 多基因家族（MGF）检测：针对病毒基因组中高度可变的MGF区域，可用于毒株分型与流行病学分析。
ASFV 荧光定量PCR（qPCR）检测：通过实时荧光信号对病毒核酸进行定量分析，用于病毒载量测定和感染进程评估。
ASFV 巢式PCR（nested PCR）检测：采用两轮扩增提高检测灵敏度和特异性，适用于极低病毒含量样本。
ASFV 数字PCR（dPCR）检测：基于微滴或微孔分割的绝对定量技术，无需标准曲线，精确定量病毒核酸拷贝数。
ASFV 多重PCR（multiplex PCR）检测：在同一反应体系中同时扩增多个靶基因，用于同步鉴别诊断或基因型分析。
ASFV 逆转录PCR（RT-PCR）检测：用于检测病毒在复制过程中可能产生的mRNA，指示病毒的活跃复制状态。
ASFV 快速现场PCR（Point-of-care PCR）检测：采用便携式设备进行快速、简化的PCR检测，适用于现场初步筛查。
临床疑似病猪全血样本：采集发病猪的抗凝全血，是检测病毒血症的主要样本类型。
病死猪组织器官样本：包括脾脏、淋巴结、肝脏、肺脏等病变明显的器官组织匀浆液。
环境拭子样本：对养殖场、运输车辆、屠宰场等环境表面进行采样，监测病毒污染情况。
猪肉及猪肉制品样本：对市场流通的鲜肉、冻肉、加工制品进行抽样检测，用于食品安全监控。
饲料及原料样本：检测可能被污染的饲料、血浆蛋白粉等，追溯可能的传播源头。
蜱虫等媒介生物样本：对钝缘蜱等潜在生物媒介进行研磨处理后的核酸提取与检测。
污水及粪便样本：对养殖场排污口、化粪池的液体或固体废弃物进行监测。
精液与胚胎等生物材料：对用于人工授精或移植的精液、胚胎等进行病毒安全检测。
疫苗及生物制品原料：对猪源细胞、血清等生物制品生产用原材料进行ASFV污染筛查。
野生动物样本：对野猪、疣猪等可能作为病毒储存宿主的野生动物组织进行监测。
样品前处理与核酸提取：采用酚-氯仿法、离心柱法或磁珠法从各类样本中高效纯化病毒DNA。
引物与探针设计合成：根据OIE或国家标准推荐的保守序列区域，设计特异性引物和荧光探针。
常规PCR扩增程序：包括预变性、变性、退火、延伸等多个温度循环步骤，完成目标DNA片段扩增。
实时荧光定量PCR（qPCR）程序：在扩增同时监测荧光信号，通过Ct值进行定量分析，通常包含UDP或TaqMan探针法。
琼脂糖凝胶电泳分析：将PCR产物进行电泳分离，通过溴化乙锭或安全核酸染料染色后于紫外灯下观察条带。
扩增产物测序验证：对阳性PCR产物进行Sanger测序，将序列与数据库比对以确认结果准确性。
阳性与阴性对照设置：每个检测批次必须包含已知阳性和阴性对照品，以监控实验过程的有效性。
内参基因共扩增
