一般临床观察：每日记录实验动物的外观、行为活动、摄食与饮水情况、分泌物及排泄物等，评估其整体健康状况。
体重与摄食量：定期称量动物体重并记录饲料消耗量，计算食物利用率，是评估全身性毒性的基本且敏感的指标。
血液学检查：检测红细胞、白细胞、血小板计数及其相关参数，评估纳米材料对造血系统的潜在影响。
血清生化指标：分析肝功能（如ALT、AST）、肾功能（如BUN、Cr）、电解质及蛋白质代谢等指标，反映主要器官的功能状态。
脏器重量与系数：试验结束后称取心、肝、脾、肺、肾、脑等主要脏器的绝对重量并计算其相对于体重的脏器系数，初步判断靶器官毒性。
组织病理学检查：对上述脏器及可能的靶器官进行固定、切片、染色，在光学显微镜下观察细胞和组织结构的病理变化，是毒性确认的关键手段。
尿液分析：检测尿液的理化性质、有形成分及生化指标，辅助评估肾脏功能及全身代谢状况。
氧化应激标志物：测定肝脏、肺等组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量，评估纳米材料诱导的氧化损伤。
炎症因子检测：通过ELISA等方法检测血清或组织匀浆中TNF-α、IL-6等炎症因子水平，反映纳米材料引发的炎症反应。
纳米材料生物分布：利用同位素标记或ICP-MS等技术，定量分析纳米材料在主要器官和组织中的蓄积情况，了解其药代动力学行为。
金属及金属氧化物纳米材料：如纳米银、纳米二氧化钛、纳米氧化锌等，广泛用于抗菌、化妆品等领域，需关注其离子释放导致的毒性。
碳基纳米材料：包括碳纳米管、石墨烯、富勒烯等，其独特的物理化学性质可能引起肺纤维化、炎症等特殊毒性。
聚合物纳米材料：如PLGA、壳聚糖纳米粒等药物载体，需评估其降解产物及载体材料本身的长期毒性。
半导体量子点：如CdSe/ZnS等，核心重金属离子的潜在泄漏是其长期安全性的主要关注点。
脂质体与胶束：作为递送系统，需考察其组分及添加剂在亚慢性暴露下的安全性。
二氧化硅纳米材料：介孔二氧化硅等，需研究其生物降解性及对肺部和肝脏的长期影响。
复合材料与功能化纳米材料：表面经过修饰或负载药物的复合纳米材料，其毒性可能源于核心材料、涂层或协同作用。
医用植入纳米材料：用于骨修复、齿科等领域的长期植入纳米材料，需进行严格的局部和全身亚慢性毒性评价。
食品及相关纳米材料：作为食品添加剂、包装材料的纳米成分，通过口服途径的亚慢性毒性数据至关重要。
环境暴露相关纳米材料：模拟环境中可能通过呼吸、皮肤接触等途径长期低剂量暴露的纳米颗粒，评估其累积风险。
重复剂量毒性试验：遵循OECD测试指南（如OECD TG 407, 408），通过连续28天或90天经口、吸入或皮肤途径给予受试物，系统观察毒性效应。
血液学自动分析仪法：使用全自动血液分析仪，采用电阻抗法或流式细胞术原理，快速、准确地完成血细胞计数与分类。
全自动生化分析仪法：基于光电比色原理，使用配套试剂盒对血清样本中的多种酶类和代谢物进行定量分析。
组织病理学石蜡切片技术：包括组织取材与固定、脱水透明、石蜡包埋、切片、苏木精-伊红（H&E）染色等一系列标准化操作。
酶联免疫吸附测定法：利用抗原-抗体特异性反应，定量检测生物样本中低浓度的特定蛋白或炎症因子。
电感耦合等离子体质谱法
实时荧光定量PCR法：从目标组织中提取RNA并反转录为cDNA，通过荧光信号扩增定量特定基因（如炎症、凋亡相关基因）的表达水平。
Western Blot蛋白印迹法：用于检测特定蛋白在组织中的表达量变化，验证可能与毒性机制相关的蛋白通路。
透射电子显微镜观察：制备超薄切片，在更高分辨率下观察纳米材料在细胞内的定位及引起的亚细胞器超微结构改变。
彗星试验：又称单细胞凝胶电泳，是一种快速、灵敏的用于检测纳米材料是否引起单个细胞DNA损伤的方法。
动物实验饲养系统：提供独立通风笼具或隔离器，精确控制温度、湿度、光照周期，确保暴露环境稳定且符合动物福利要求。
电子天平: 高精度天平用于准确称量动物体重、饲料重量以及脏器重量，是获取基础数据的关键设备。
全自动血液细胞分析仪
全自动生化分析仪
病理组织处理系统
光学显微镜及图像分析系统
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