微卫星不稳定性检测

发布时间:2026-06-11 10:55:26

检测项目

BAT-25:位于基因内含子区的一个单腺嘌呤重复序列,是MSI检测中最敏感和特异的标志物之一。

BAT-26:另一个高度敏感的腺嘌呤重复序列标志物,在结直肠癌等肿瘤中具有极高的不稳定性。

NR-21:一个21个胞嘧啶重复的微卫星位点,对MSI-H状态的检测具有高度特异性。

NR-24:包含24个腺嘌呤重复的位点,是Pentaplex panel中的标准检测位点之一。

MONO-27:一个27个胞嘧啶重复的位点,常用于补充其他标志物以提高检测准确性。

D2S123:一个二核苷酸重复序列,是传统NCI panel中的关键位点,用于判断MSI状态。

D5S346:另一个二核苷酸重复标志物,常与D2S123等联合使用于经典的Bethesda panel中。

D17S250:位于17号染色体的二核苷酸重复序列,是早期MSI检测的核心参考位点。

Penta C:五核苷酸重复序列标志物,主要用于区分肿瘤组织和正常组织的配对样本。

Penta D:另一个五核苷酸重复标志物,常与Penta C联用,作为样本标识和内对照。

检测范围

林奇综合征筛查:作为遗传性非息肉病性结直肠癌的初筛手段,识别错配修复基因缺陷的携带者。

散发性结直肠癌:评估肿瘤的MSI状态,用于预后判断和指导免疫治疗等临床决策。

子宫内膜癌:子宫内膜癌尤其是非子宫内膜样癌中MSI发生率较高,检测有助于分型和治疗选择。

胃癌:部分胃癌特别是肠型胃癌存在MSI-H,与特定的临床病理特征和较好预后相关。

小肠腺癌:用于鉴别诊断和评估林奇综合征相关的小肠肿瘤风险。

皮脂腺肿瘤:Muir-Torre综合征相关肿瘤的分子诊断依据之一。

胶质母细胞瘤:部分病例存在MSI,可能与替莫唑胺耐药性产生有关。

前列腺癌:研究性应用,探索MSI状态在前列腺癌发生发展及治疗中的意义。

胰腺癌:少数胰腺癌呈现MSI-H状态,是筛选可能从免疫检查点抑制剂中获益患者的依据。

泛癌种筛查:随着精准医疗发展,MSI检测已扩展至多种实体瘤,以寻找免疫治疗潜在获益人群。

检测方法

聚合酶链式反应-毛细管电泳法:金标准方法,通过比较肿瘤与正常组织DNA的PCR产物片段长度差异进行判断。

免疫组织化学法:检测错配修复蛋白的表达缺失,间接推断MSI状态,快速且成本较低。

下一代测序法:基于大panel或全外显子测序,可同时检测MSI状态和大量基因突变,通量高信息全。

多重荧光PCR结合片段分析:采用多重荧光标记引物扩增多个位点,通过自动化分析软件判读结果。

单分子分子倒置探针技术:一种高通量靶向测序方法,能够精确检测微卫星区域的长度变化。

数字PCR法:通过绝对定量分析特定微卫星位点的等位基因失衡,灵敏度极高。

甲基化特异性PCR: 检测MLH1等错配修复基因启动子区甲基化,用于区分散发性和遗传性MSI肿瘤。

微卫星不稳定性芯片分析: 利用定制化芯片同时分析成百上千个微卫星位点,主要用于科研。

Sanger测序验证法: 通常作为PCR-毛细管电泳法结果的补充验证手段,提供序列信息。

<强>TaqMan探针实时定量PCR法: 开发中的快速检测方法,旨在实现MSI状态的快速、定量分析。

检测仪器设备

<强>ABI系列基因分析仪(如3500系列): 进行毛细管电泳的核心设备,用于分离和检测荧光标记的PCR片段。

<强>实时荧光定量PCR仪: 用于进行基于探针的定量MSI检测或相关基因表达分析。

<强>下一代测序平台(如Illumina NovaSeq, MGI DNBSEQ): 进行大规模平行测序,实现基于NGS的MSI状态分析。

<强>全自动免疫组化染色机: 标准化进行MMR蛋白(MLH1, PMS2, MSH2, MSH6)的IHC染色。

<强>数字PCR系统(如Bio-Rad QX200): 提供绝对定量的高灵敏度检测平台,适用于微量样本分析。

<强>核酸提取纯化工作站: 自动化从福尔马林固定石蜡包埋组织或新鲜组织中提取高质量DNA。

<强>PCR扩增仪: 进行微卫星位点靶向扩增的关键温控设备。

<强>生物片段分析仪(如Agilent Bioanalyzer): 评估提取DNA的质量和完整性,确保后续检测可靠性。

<强>显微镜及图像分析系统: 观察和评估免疫组化切片结果,并进行半定量分析。

<强>生物信息学分析服务器与软件: 专门用于处理和分析NGS或片段分析产生的原始数据,自动计算MSI评分。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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