离心机肿瘤细胞捕获试验

发布时间:2026-05-27 09:35:04

检测项目

循环肿瘤细胞计数:定量检测患者外周血中每毫升血液所含的循环肿瘤细胞绝对数量,是评估肿瘤负荷的重要指标。

上皮源性CTC鉴定:通过检测上皮细胞粘附分子等标志物,确认捕获的细胞来源于上皮组织,是区分CTC与血细胞的关键。

间质型CTC鉴定:检测与上皮-间质转化相关的标志物,识别具有更强侵袭和转移潜能的CTC亚群。

CTC细胞活力检测:评估捕获的CTC是否具有活性,对于后续细胞培养及药物敏感性测试至关重要。

肿瘤干细胞标志物检测:在CTC中鉴定CD44、CD133等干细胞标志物,以评估其自我更新和成瘤能力。

CTC细胞簇检测:识别并计数以细胞团形式存在的CTC,这类CTC通常具有更高的转移效率。

治疗靶点表达分析:检测CTC表面HER2、EGFR、PD-L1等蛋白的表达水平,为靶向或免疫治疗提供依据。

基因突变分析:对单个CTC或CTC群体进行DNA测序,分析EGFR、KRAS等驱动基因的突变状态。

RNA表达谱分析:通过单细胞RNA测序等技术,分析CTC的基因表达特征,研究其异质性和功能状态。

染色体核型分析:检测CTC的染色体数目异常和结构变异,评估其基因组不稳定性。

检测范围

非小细胞肺癌:适用于肺腺癌、鳞癌等常见肺癌类型的CTC检测,用于监测转移和疗效。

乳腺癌:广泛应用于各期乳腺癌,特别是晚期患者的病情监控和预后判断。

结直肠癌:用于检测结直肠癌患者外周血中的CTC,辅助评估术后复发风险。

前列腺癌:对于去势抵抗性前列腺癌,CTC计数是重要的无创性疗效监测手段。

肝癌:检测肝细胞癌患者血液中的CTC,有助于预测肝内播散和血管侵犯。

胰腺癌:由于胰腺癌组织难以获取,CTC检测为诊断和病情评估提供了替代方案。

膀胱癌:用于肌层浸润性膀胱癌的预后分层和复发监测。

卵巢癌:监测晚期卵巢癌患者的治疗反应,探索其与CA125等标志物的关联。

头颈部肿瘤:应用于鼻咽癌、口腔癌等,研究CTC与淋巴结转移的关系。

其他实体肿瘤:原则上适用于所有上皮来源的恶性肿瘤,覆盖胃癌、食管癌等多种癌种。

检测方法

密度梯度离心法:利用Ficoll等分离液,基于细胞密度差异初步富集单核细胞层,包含CTC。

红细胞裂解法:使用氯化铵等裂解液选择性裂解红细胞,减少背景干扰,简化样本。

免疫磁珠负向筛选:用抗CD45等白细胞共同抗原的磁珠去除白细胞,实现对CTC的间接富集。

免疫磁珠正向筛选:使用抗上皮细胞粘附分子的抗体包被磁珠,特异性捕获并分离CTC。

细胞固定与透化:使用多聚甲醛固定细胞结构,并用Triton X-100等透化细胞膜,便于抗体进入。

免疫荧光染色:采用CK/EpCAM、CD45、DAPI组合染色,分别标记上皮细胞、白细胞和细胞核,进行CTC鉴定。

荧光显微镜扫描与成像:使用自动荧光显微镜对玻片进行全视野扫描,捕获多通道荧光图像。

图像分析与判读:通过专用软件分析图像,根据预设标准(如CK+/CD45-/DAPI+)自动识别CTC。

单细胞分离与获取:利用显微操作或激光显微切割技术,从样本中分离出单个CTC用于下游分析。

下游分子分析:对富集的CTC进行全基因组扩增、RT-PCR或下一代测序,获取基因组和转录组信息。

检测仪器设备

医用低速离心机:用于血液样本的初步离心、血浆分离及密度梯度离心步骤,要求转速稳定可控。

生物安全柜:提供无菌洁净的操作环境,确保样本处理过程免受污染,并保护操作人员安全。

涡旋振荡器:用于充分混匀血液样本、裂解液或磁珠悬液,确保反应体系均匀一致。

磁力架或磁性分离器:在进行免疫磁珠分选时,用于固定磁珠-细胞复合物,实现液相分离。

恒温孵育器:为抗体孵育、细胞固定等步骤提供精确且恒定的温度条件(如4℃或37℃)。

微量加样器及吸头:用于精确移取不同体积的样本、试剂和缓冲液,是液体操作的核心工具。

自动荧光扫描显微镜:核心成像设备,可自动对染色后的玻片进行高速、高分辨率的多通道荧光扫描。

高性能图像分析工作站:配备专业细胞图像分析软件的高性能计算机,用于处理海量图像并自动识别CTC。

细胞计数板或自动细胞计数器:用于对富集后的细胞悬液进行计数,评估细胞回收率和浓度。

超低温冰箱:用于长期保存分离后的CTC样本、重要试剂及抗体,通常需要-80℃保存条件。

检测服务流程

沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。

签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。

样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。

试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。

出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。

我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。

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