细胞计数与存活率测定:采用台盼蓝染色排除法,活细胞拒染率≥95%,死细胞计数误差≤5%;检测设备:血球计数板/自动细胞计数仪。
MTT比色法检测:四甲基偶氮唑盐还原能力测试,波长490nm吸光度值测量,线性范围103-106cells/mL,重复性RSD≤3%。
CCK-8法增殖分析:水溶性四唑盐WST-8代谢检测,450nm波长读数,灵敏度达500cells/孔,孵育时间标准化为1-4小时。
BrdU标记检测:5-溴-2'-脱氧尿苷掺入率测定,使用抗BrdU单克隆抗体,ELISA法读数OD450,掺入时间精确控制2-24小时。
ATP含量测定:荧光素酶化学发光法,检测限0.1nmol/L,线性范围1-100μmol/L,反映细胞能量代谢状态。
乳酸脱氢酶释放率:LDH细胞毒性检测,波长490nm/680nm双波长校正,细胞损伤判定阈值≥15%释放量。
细胞周期分布分析:碘化丙啶染色流式检测,PI浓度50μg/mL,激发波长488nm,G0/G1期分辨率CV值≤5%。
凋亡率检测:Annexin V-FITC/PI双染法,早期凋亡细胞判定标准:Annexin V+/PI-。
群体倍增时间计算:依据公式Td = t × ln2 / ln(Nt/N0),连续计数3代以上,数据采集间隔12±0.5小时。
克隆形成能力评估:低密度接种(50-100cells/cm²),甲醇固定后0.1%结晶紫染色,直径≥50μm集落计入有效克隆。
肿瘤细胞株药理研究:包括HeLa、A549、HepG2等常见癌细胞,用于化疗药物IC50值测定。
免疫细胞功能评估:T淋巴细胞、NK细胞扩增能力检测,需添加IL-2等特定细胞因子。
干细胞体外扩增监控:间充质干细胞、造血干细胞的传代稳定性测试,代次限定P3-P8。
生物制品效力评价:干扰素、生长因子等生物活性物质促增殖效应检测。
细胞治疗产品质控:CAR-T细胞制备过程中增殖动力学分析,需符合GMP规范。
纳米材料生物相容性:材料浸提液处理后的细胞相对增殖率(RGR)测定。
培养基组分优化:胎牛血清替代物、无血清培养基的性能验证。
医疗器械浸提液测试:根据ISO 10993-5标准进行浸提液细胞毒性评级。
病毒疫苗生产监控:Vero细胞、MDCK细胞增殖状态与病毒产量的相关性分析。
海洋生物活性物质筛选:海绵提取物、藻类多糖等天然产物的促/抑增殖作用研究。
ISO 10993-5:2009医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验
ASTM E2526-08(2014)纳米材料对悬浮细胞毒性的标准试验方法
GB/T 16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分:体外细胞毒性试验
USP <1043>细胞与基因治疗产品检测章节
EP 2.7.1欧洲药典细胞增殖测定法
JJF 1815-2020细胞计数仪校准规范
GB/T 39730-2020细胞中ATP浓度检测方法
ISO 20391-1:2018细胞计数标准-第1部分:实验设计
YY/T 0993-2015医疗器械生物学评价细胞增殖试验方法
FDA Guidance for Industry: Process Validation (2011)
酶标仪:具备450nm/490nm/570nm多波长检测能力,支持动力学扫描模式,用于MTT/CCK-8等比色法检测。
流式细胞仪:配置488nm/640nm双激光器,前向/侧向散射光检测,实现细胞周期、凋亡率的精准分析。
自动细胞计数器:双荧光通道(AO/PI),计数范围1×104-1×107cells/mL,CV值≤2%。
二氧化碳培养箱:温度控制精度±0.2℃,CO2浓度控制±0.1%,内置HEPA过滤系统。
生物安全柜:Class II A2型,风速0.3-0.5m/s,沉降菌≤1CFU/皿·4小时。
化学发光检测系统:灵敏度达10-21mol ATP,动态范围6个数量级,用于高精度ATP检测。
活细胞成像系统:配置相位差/荧光模块,支持长时间动态观测,温度控制精度±0.5℃。
沟通检测需求:为精准把握客户需求,我们会仔细审核申请内容,与客户深入交流,精准识别样品类型、明确测试要求,全面收集相关信息,确保无遗漏。
签订协议:根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节,为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。
样品前处理:收到样品后,开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员,科学严谨对待每个细节,保证前处理规范准确。
试验测试:此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品,实验设计与操作均遵循科学标准,保障测试结果准确且可重复。
出具报告:测试结束立即生成详尽检测报告,经严格审核确保结果可靠准确,审核通过后交付客户。
我们秉持严谨踏实的态度,提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯,严格遵守保密协议,保障客户满意度与信任度。