本检测体系针对畜肉食品中牛源性成分的定性识别设立以下核心项目：
牛源性特异性基因片段检测：基于线粒体细胞色素b基因（Cytb）、核基因组β-actin基因等保守序列进行物种鉴定
物种特异性蛋白标记物分析：包括牛免疫球蛋白G（IgG）、肌红蛋白等特征性蛋白质的免疫学识别
热加工产物干扰排除：建立热处理样本（≥120℃/20min）的DNA降解补偿检测方案
混合肉源鉴别：开发多重PCR体系实现牛成分在复合肉制品中的特异性检出
本检测方案适用于以下食品基质的牛源性成分筛查：
依据GB/T20190-2006标准建立扩增体系：取50mg样本经CTAB法提取基因组DNA后，使用TaqMan探针针对牛线粒体D-loop区设计特异性引物（F:5'-CGAGAAGACCCTATGGAGCT-3'；R:5'-TGTGCTATGTAAGTGCGATT-3'）。反应条件为95℃预变性5min后进入40个循环（95℃15s,60℃30s），通过Ct值≤35且扩增曲线呈典型S型判定阳性。
采用六引物体系（F3/B3/FIP/BIP/LF/LB）靶向牛β-casein基因保守区。反应体系含BstDNA聚合酶1.6U、dNTPs1.4mM、MgSO48mM及钙黄绿素指示剂。63℃恒温扩增60min后通过浊度仪测定OD650≥0.1或显色变更为判定阈值。
基于双抗体夹心法原理：包被抗牛IgG单克隆抗体（1:2000稀释），加入样本浸提液后37℃孵育1h。依次加入HRP标记二抗（1:5000）和TMB底物显色15min，450nm波长测定OD值≥0.25判为阳性。
采用QExactiveHF-X质谱系统：取1g样本经胰蛋白酶酶解后，通过nanoLC分离肽段并进行DDA扫描（分辨率120,000）。数据库检索设定牛物种限定条件（UniProtKBTaxID=9913），要求至少检出5个特异性肽段且score值＞30。
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沟通检测需求：为精准把握客户需求，我们会仔细审核申请内容，与客户深入交流，精准识别样品类型、明确测试要求，全面收集相关信息，确保无遗漏。
签订协议：根据沟通确定的检测需求及商定的服务细节，为客户定制包含委托书及保密协议的个性化协议。后续检测严格依协议执行。
样品前处理：收到样品后，开展样品预处理、制样及标准溶液制备等前处理工作。凭借先进仪器设备和专业技术人员，科学严谨对待每个细节，保证前处理规范准确。
试验测试：此为检测核心环节。运用规范实验测试方法精确检测每个样品，实验设计与操作均遵循科学标准，保障测试结果准确且可重复。
出具报告：测试结束立即生成详尽检测报告，经严格审核确保结果可靠准确，审核通过后交付客户。
我们秉持严谨踏实的态度，提供高品质、专业化检测服务。服务全程可追溯，严格遵守保密协议，保障客户满意度与信任度。
